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分子生物学实验技术

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作者吕立夏,王平,徐磊 编

出版社科学出版社

ISBN9787030744739

出版时间2023-04

装帧平装

开本16开

定价59.8元

货号1202849291

上书时间2024-12-04

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   商品详情   

品相描述:全新
商品描述
目录
第一章 CRISPR/Cas9技术 1

概述 1

实验1-1 小向导RNA(sgRNA)设计与载体构建 5

实验1-2 重组质粒的转化和单克隆筛选鉴定 14

实验1-3 重组质粒抽提和鉴定 17

实验1-4 细胞转染及阳性克隆鉴定 18

实验1-5 基因编辑效率检测 21

实验1-6 逆转录定量PCR(RT-qPCR)检测目标基因表达 24

实验1-7 蛋白质印迹法(Western blotting)检测目标蛋白的表达 28

第二章 基因转录调控分析 31

概述 31

实验2-1 双萤光素酶报告基因检测 36

实验2-2 染色质免疫沉淀PCR(ChIP-PCR) 40

实验2-3 染色质免疫沉淀测序(ChIP-seq) 43

实验2-4 靶标的切割和标记(CUT&Tag)实验 44

实验2-5 甲醛辅助鉴定调控元件技术 47

实验2-6 单细胞ATAC-seq 49

实验2-7 重亚硫酸盐全基因组甲基化测序 50

第三章 非编码RNA分析 53

概述 53

实验3-1 长非编码RNA(lncRNA)靶基因预测及功能分析 59

实验3-2 利用在线工具对某一环状RNA(circRNA)进行初步分析 66

实验3-3 circRNA的RT-qPCR检测 71

实验3-4 circRNA过表达及验证 74

第四章 单细胞技术 78

概述 78

实验4-1 视网膜单细胞悬液制备 84

第五章 蛋白质-蛋白质相互作用分析 87

概述 87

实验5-1 酵母双杂交 98

实验5-2 拉下(pull-down)实验 101

实验5-3 免疫共沉淀 103

实验5-4 荧光共振能量转移 106

第六章 定点诱变与蛋白质翻译后修饰 108

概述 108

实验6-1 PCR 介导的快速定点诱变 113

实验6-2 蛋白质小分子泛素相关修饰物蛋白(SUMO)化位点鉴定 115

实验6-3 蛋白质泛素化检测——变性免疫沉淀法 116

实验6-4 蛋白质泛素化检测——镍NTA 亲和层析法 117

实验6-5 蛋白质泛素化检测——体内TUBEs 法119

实验6-6 蛋白质泛素化检测——体外检测法 120

第七章 基本生物信息在线工具的使用 122

概述 122

实验7-1 GEO 数据下载及差异基因分析 123

实验7-2 利用在线工具对差异基因进行聚类分析 131

实验7-3 蛋白质相互作用网络的构建和hub基因筛选 132

内容摘要
分子生物学技术发展迅速,使得在分子水平解析生命现象、生命本质成为可能。《分子生物学实验技术》聚焦新近分子生物学技术进展编写而成。《分子生物学实验技术》包括七章:第一章CRISPR/Cas9技术,包括基因编辑的概述、小向导RNA(sg RNA)的克隆与鉴定;第二章基因转录调控分析,包括启动子分析、转录因子鉴定及表观遗传调控;第三章非编码RNA分析,涉及非编码RNA的生物信息分析及功能分析;第四章单细胞技术,简述单细胞技术的原理及其应用;第五章蛋白质-蛋白质相互作用分析,包括蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)数据库和常用的检测 PPI 的方法;第六章定点诱变与蛋白质翻译后修饰,重点介绍聚合酶链反应(PCR)介导的快速定点诱变、蛋白质小分子泛素相关修饰物蛋白(SUMO)化位点鉴定以及蛋白质泛素化的检测方法;第七章基本生物信息在线工具的使用,包括基因表达总览(Gene Expression Omnibus,GEO)、注释、可视化和整合发现数据库(Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery,DAVID)、细胞景观(cytoscape)、STRING和enrichr等。本书适合高等医学院校生物医学专业研究生及教师使用。

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