生物科学专业实验指导(刘宇博)

生物学是一门以实验为手段研究生命活动规律的学科，因此实验教学在生物学人才培养中占有重要地位。高校生物学实验教材既需要与理论教学相衔接，又需要与时俱进。本实验教材结合理工型高校生物学科定位、人才培养目标和办学特色，涵盖动物学、植物学、生理学、植物生理学、遗传学、生物化学、分子生物学、细胞生物学、微生物学和人体解剖学在内的 10 门生物学科实验教学内容。本教材系统考虑生物专业的必要实验并合理分布到有关理论课程的对应部分，避免了各门课程对应实验的简单重复或相互脱节。同时，本实验教材增设了培养学生实践创新能力的生物科学综合实验部分，以期提高生物学科的实验教学水平，并对理工型高校生物学科的实验教学起到一定的示范和参考作用。 
全书由大连理工大学生命科学与药学学院教师编写。具体分工如下：第一章由王黎编写；第二、四章由徐品三编写；第三章由史美云编写；第五章由张郑瑶编写；第六、七章由刘宇博、李文利、黄煌共同编写；第八章由薛宏宇编写；第九章由贺雷雨编写；第十章由韩彦槊编写；第十一章由赵静编写。全书由刘宇博和李文利拟订提纲，黄煌统稿，赵静审定并组织实施。 
由于时间仓促、编写水平有限，书中疏漏之处在所难免，诚恳希望读者批评指正。 

编者 
2023年1月 

本实验教材共有91个实验，内容较多，包含普通动物学、普通植物学、生理学、普通植物生理学、遗传学、生物化学、分子生物学、细胞生物学、微生物学、人体解剖学实验以及为培养学生科研思维而设置的生物科学综合实验。实验项目的设置与高等院校生命科学相关专业本科教材内容配套的同时涵盖了多种生命科学前沿技术和方法，印证教材理论的同时可进一步拓宽学生的知识面，为其从事生物技术及其相关领域的科学研究工作打下基础。本实验教材每一实验章节，设置了课程简介、教学目标和实验项目概述，引领学生通过预习主动衔接实验课程技术和理论课程知识，形成专业知识体系。同时为方便教学，实验项目基本上都按实验目的、实验原理、实验器材及试剂、实验步骤、注意事项和思考题，这五个部分来编写。本书内容全面，可操作性强，可作为理工型高校生物相关专业本科生实验教材，也可为相关科研人员提供实验技术参考。

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第一章 动物学实验 001 
实验一 学习使用显微镜  002 
实验二 原生动物的形态与结构  006 
实验三 腔肠动物的外形与结构  007 
实验四 扁形动物的形态与结构  009 
实验五 原腔动物的形态与构造  011 
实验六 节肢动物的外形和内部构造  013 
实验七 鲫鱼的外形和内部解剖  017 
实验八 小鼠的外形和内部解剖  020 

第二章 植物学实验 024 
实验一 植物细胞的观察  025 
实验二 植物各种组织的观察  026 
实验三 种子和幼苗的观察  029 
实验四 根的形态结构 031 
实验五 茎的形态和结构  034 
实验六 藻类和苔藓的观察  035 
本章附录  037 

第三章 生理学实验 039 
实验一 红细胞渗透脆性实验  040 
实验二 家兔的解剖观察  042 
实验三 家兔呼吸运动的调节  044 
实验四 蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备及不同强度和频率刺激对肌肉收缩的影响  046 
实验五 反射弧分析、期前收缩与代偿间歇  051 
实验六 人体心音听诊  053 
实验七 人体血压测量  054 
实验八 蛙心起搏点的观察与分析  056 
实验九 离体蛙心灌流实验  057 
实验十 小鼠一侧小脑损毁的效应  061 
实验十一 离体小肠段平滑肌生理特性的观察  062 

第四章 植物生理学实验 066 
实验一 植物组织水势的测定  067 
实验二 根系活力的测定  068 
实验三 叶绿素 a、叶绿素 b 含量的测定  070 
实验四 植物光合强度的测定  072 
实验五 植物呼吸强度的测定  073 
实验六 丙二醛的测定  074 
实验七 种子活力的测定  076 
实验八 果蔬含酸量的测定  077 
实验九 果蔬维生素 C 含量的测定  078 

第五章 遗传学实验 081 
实验一 果蝇性别鉴定、常见性状及生活史观察  082 
实验二 植物多倍体诱发及微核检测  085 
实验三 植物细胞线粒体 DNA 的提取  089 
实验四 植物细胞叶绿体 DNA 的分离纯化  091 
实验五 哺乳动物细胞染色体标本的制备和观察  093 
实验六 人体细胞性染色质的检测  095 
实验七 人类 PTC 味盲基因的遗传学分析  097 
实验八 多基因遗传的人类指纹嵴分析  099 
实验九 绿色荧光蛋白突变基因在大肠杆菌的表达与检测  101 
实验十 人类亲子关系鉴定  107 

第六章 生物化学实验 111 
实验一 醋酸纤维素薄膜电泳法分离牛血清蛋白  112 
实验二 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度  115 
实验三 3，5-二硝基水杨酸法测定食用面粉中的总糖和还原糖  118 
实验四 肝糖原的提取和鉴定  120 
实验五 转氨酶的转氨基反应鉴定  123 
实验六 DNA 的琼脂糖凝胶电泳检测  126 
实验七 碱性磷酸酶的提纯、Km 值计算及比活力测定  128 
实验八 聚丙烯酰胺凝胶电泳测蛋白质的分子量  132 
实验九 免疫印迹法鉴定目的蛋白  136 
实验十 肌糖原的酵解作用  139 

第七章 分子生物学实验 143 
实验一 PCR 扩增碱性磷酸酶基因（phoA） 及琼脂糖凝胶电泳检测  144 
实验二 质粒 DNA 的制备  147 
实验三 DNA 片段酶切与琼脂糖凝胶电泳回收  149 
实验四 目的基因片段与载体的连接  152 
实验五 大肠杆菌感受态制备与 DNA 转化  153 
实验六 阳性克隆的筛选和酶切鉴定  155 
实验七 动物基因组 DNA 的提取  157 
实验八 植物基因组DNA 提取  159 
实验九 微生物基因 DNA 的提取  160 
实验十 动植物 mRNA 的提取及 cDNA 合成  163 

第八章 细胞生物学实验 167 
实验一 动物细胞培养的无菌准备及主要仪器设备的使用  167 
实验二 动物细胞培养及动物细胞计数  171 
实验三 细胞的传代培养和形态观察  173 
实验四 细胞的冻存  175 
实验五 细胞的复苏  177 
实验六 动物细胞盖玻片单层培养及细胞骨架和细胞核观察  178 
实验七 MTT 法测定动物细胞生长曲线  181 
实验八 细胞迁移分析——划痕实验  183 
实验九 抗癌药物对肿瘤细胞增殖的影响 （设计性实验）  184 

第九章 微生物学实验 186 
实验一 培养基的配制与灭菌  187 
实验二 微生物的分离与接种技术  189 
实验三 平板菌落计数  191 
实验四 酵母的计数和形态观察  192 
实验五 细菌染色技术和形态观察  194 
实验六 放线菌的形态观察  196 
实验七 霉菌的形态观察  198 
实验八 细菌生长曲线的测定  199 
实验九 噬菌体分离与纯化技术  201 

第十章 人体解剖学实验 204 
实验一 运动系统  205 
实验二 消化系统和呼吸系统  207 
实验三 泌尿系统和生殖系统  209 
实验四 心血管系统  211 
实验五 感官（眼耳）和周围神经系统  213 
实验六 中枢神经传导通路和内分泌系统  214 

第十一章 生物科学综合实验 217 
实验一 pEGFP-C1-Mastl真核表达载体的构建  218 
实验二 pEGFP-C1-Mastl重组质粒转染 HeLa 细胞  225 
实验三 MTT 法检测 Mastl对细胞增殖的影响  229 

参考文献 232

本实验教材共有91个实验，内容较多，包含普通动物学、普通植物学、生理学、普通植物生理学、遗传学、生物化学、分子生物学、细胞生物学、微生物学、人体解剖学实验以及为培养学生科研思维而设置的生物科学综合实验。实验项目的设置与高等院校生命科学相关专业本科教材内容配套的同时涵盖了多种生命科学前沿技术和方法，印证教材理论的同时可进一步拓宽学生的知识面，为其从事生物技术及其相关领域的科学研究工作打下基础。本实验教材每一实验章节，设置了课程简介、教学目标和实验项目概述，引领学生通过预习主动衔接实验课程技术和理论课程知识，形成专业知识体系。同时为方便教学，实验项目基本上都按实验目的、实验原理、实验器材及试剂、实验步骤、注意事项和思考题，这五个部分来编写。本书内容全面，可操作性强，可作为理工型高校生物相关专业本科生实验教材，也可为相关科研人员提供实验技术参考。

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