微囊藻毒素生物降解研究

图书标准信息

• 作者 王华生、王俊峰、闫海 著
• 出版社 科学出版社
• 出版时间 2017-10
• 版次 31
• ISBN 9787030546715
• 定价 68.00元
• 装帧 平装
• 开本 32开
• 页数 116页
• 字数 144千字
• 正文语种 简体中文

【内容简介】

微囊藻毒素（microcystins，MCs）是一类能诱发肝脏肿瘤的单环七肽化合物，其化学性质稳定，常规水处理技术难以有效去除，而微生物法是去除MCs*安全和有效的方法。国内外在微生物降解MCs方面做了大量研究，但在微生物降解MCs的途径及其分子机理方面少有深入报道。本书以1株能高效降解MCs的菌株——鞘氨醇单胞菌USTB-05为研究对象，在菌体及降解酶对微囊藻毒素LR（MC-LR）降解特性研究的基础上，获取完整降解基因序列信息，并通过降解基因的克隆与表达、重组酶的活性验证及降解产物的分子结构测定，深入研究鞘氨醇单胞菌USTB-05降解MC-LR的途径与分子机理，为构建高效降解MCs的基因工程菌奠定理论基础。

【目录】

前言
章绪论1
1.1mcs的物化特、种类及其毒2
1.1.1mcs的种类及其结构特点2
1.1.2mcs的毒3
1.2mcs的提纯与分析检测4
1.2.1mcs的提纯4
1.2.2mcs的分析检测5
1.3mcs的物理和化学去除法6
1.3.1物理法6
1.3.2化学法7
1.4mcs微生物降解研究进展8
1.4.1混合菌降解mcs8
1.4.2纯菌种降解mcs8
1.5mcs降解途径及分子机理研究进展11
1.5.1mcs酶催化降解11
1.5.2mcs微生物降解基因11
1.5.3mcs降解途径及分子机理12
1.6ustb-05菌株简介15
第2章研究的技术路线、研究方法与实验条件17
2.1研究思路及技术路线17
2.2实验条件19
2.2.1实验材料19
2.2.2实验设备19
2.2.3样品测试方法20
第3章菌株ustb-05降解mc-lr的特研究22
3.1实验方法22
3.1.1ustb-05菌培养22
3.1.2mcs的提纯22
3.2氧气对ustb-05菌降解mc-lr的影响22
3.3温度对ustb-05菌降解mc-lr的影响23
3.4初始ph对ustb-05菌降解mc-lr的影响24
3.5不同条件下ustb-05菌的生长情况25
3.6ustb-05菌对mc-lr的降解动力学25
3.7本章小结26
第4章菌株ustb-05降解mc-lr的基因特研究27
4.1实验方法27
4.1.1ustb-05菌无细胞提取液的制备27
4.1.2ustb-05菌基因组提取27
4.1.3质粒的提取28
4.1.4dna凝胶电泳29
4.1.5目的片段回收29
4.1.6目的基因与pgem-teasy载体连接29
4.1.7连接产物转化至感受态细胞30
4.1.8测序31
4.2ustb-05菌无细胞提取液降解mc-lr特31
4.3降解基因序列初步探索33
4.4降解基因序列反向pcr扩增35
4.5ustb-05菌降解mc-lr完整基因序列信息38
4.6降解基因序列分析41
4.7本章小结45
第5章mc-lr降解基因的克隆47
5.1基本思路47
5.2pcr扩增48
5.2.1引物设计48
5.2.2pcr反应条件50
5.2.3pcr反应结果分析51
5.3阳克隆鉴定52
5.4基因测序及比对55
5.5本章小结56
第6章重组蛋白的诱导表达与活验证58
6.1实验方法58
6.1.1目的蛋白电泳58
6.1.2重组菌ce提取59
6.2重组蛋白诱导表达59
6.3包涵体验证61
6.4重组菌a蛋白酶催化降解mc-lr活验证63
6.5重组菌b蛋白酶催化降解mc-lr及个产物65
6.6重组菌c蛋白酶催化降解mc-lr及第二个产物67
6.7重组菌c蛋白酶催化降解个产物69
6.8重组蛋白活验证归纳70
6.9本章小结71
第7章ustb-05菌降解mc-lr的途径及分子机理探讨72
7.1实验方法72
7.1.1降解产物生成72
7.1.2降解产物纯化73
7.2mc-lr降解产物质谱分析73
7.2.1产物a质谱分析73
7.2.2产物b质谱分析75
7.2.3产物c及产物d质谱分析78
7.3ustb-05菌降解mc-lr的途径及分子机理80
7.4本章小结83
第8章结论与展望85
8.1主要结论85
8.2主要创新点86
8.3展望86
参文献87
附录austb-05菌降解mc-lr完整基因序列信息95
附录b微囊藻毒素lr降解产物结构二级质谱分析102