免疫学实验技术
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全新
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作者鲍建芳,沈建根主编
出版社浙江大学出版社
ISBN9787308050371
出版时间2004-12
装帧平装
开本16开
定价40元
货号9787212
上书时间2024-12-17
商品详情
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目录
实验室守则
实验一 凝集反应
一、直接凝集反应
(一)玻片凝集试验——ABO血型鉴定
(二)试管凝集试验
二、间接凝集试验
(一)间接血球凝集试验——血清类风湿因子测定
(二)间接凝集抑制试验——妊娠试验
(三)协同凝集试验
实验二 沉淀反应
一、琼脂扩散试验
(一)单向琼脂扩散试验
(二)双向琼脂扩散试验
二、免疫电泳试验
(一)对流免疫电泳试验
(二)免疫电泳试验
(三)火箭免疫电泳试验
(四)交叉免疫电泳试验
三、环状沉淀试验
实验三 补体参与的免疫反应
一、溶血反应
二、补体结合试验
(一)溶血素单位滴定
(二)补体单位滴定
(三)正式试验
三、血清总补体含量的测定(CH50测定)
四、溶血空斑试验
五、补体介导的细胞毒试验
实验四 免疫标记技术
一、酶免疫技术
(一)酶联免疫吸附试验
(二)酶免疫组织化学技术—PAP法(可溶性酶抗酶法)
二、荧光免疫技术
(一)直接(或间接)荧光免疫法检测标本中的抗原
(二)间接荧光免疫法检测人外周血中T淋巴细胞亚群
三、金免疫技术
(一)胶体金的制备
(二)免疫金的制备
(三)斑点免疫渗滤试验
(四)斑点免疫层析试验
四、放射免疫技术
实验五 免疫印迹
一、蛋白质的电泳分离
(一)样本的制备
(二)蛋白质凝胶电泳
二、将蛋白质从凝胶中转印至膜上
(一)以PVDF膜为固相载体的半干转印法
(二)转印后切取印迹膜
(三)印迹膜蛋白染色
三、免疫检测
(一)印迹膜上非特异性蛋白质结合位点的封闭
(二)直接与间接检测方法
实验六 免疫细胞的分离与纯化
一、外周血液中白细胞的分离
(一)自然沉降法
(二)高分子聚合物沉降法
二、外周血液中单个核细胞的分离——密度梯度离心法
三、淋巴组织中淋巴细胞的分离
(一)脾细胞悬液的制备
(二)淋巴结细胞悬液的制备
(三)胸腺细胞悬液的制备
四、淋巴细胞的分离纯化
(一)分离PMNC中的淋巴细胞和巨噬细胞
(二)T细胞、B细胞及T细胞亚群的分离纯化
五、人外周血树突状细胞的分离与培养
实验七 细胞免疫功能测定
一、E玫瑰花环试验
二、淋巴细胞转化试验
(一)形态学检查法
(二)3H-TdR掺入法
三、NK细胞活性的检测
(一)乳酸脱氢酶(LDH)法检测人外周血NK细胞活性
(二)同位素法检测小鼠脾脏NK细胞活性
(三)MTT比色法检测小鼠脾脏NK细胞活性
四、LAK细胞的制备及其细胞毒活性检测
五、肿瘤浸润淋巴细胞的制备
(一)TIL的分离
(二)TIL的体外培养
六、CTL细胞毒活性检测
七、抗体介导的淋巴细胞毒试验
八、混合淋巴细胞培养试验
九、白细胞移动抑制试验
实验八 流式细胞测定技术
实验九 细胞因子及其受体的检测
一、细胞因子的生物活性检测法
(一)IL-1的生物活性检测法
(二)IL-2的生物活性检测法
(三)TNF的生物活性检测法
二、细胞因子及其受体的免疫学检测法
(一)TNF的免疫学检测法
(二)IL-2R的免疫学检测法
(三)细胞内细胞因子的免疫学检测法
三、细胞因子的生物学检测法
(一)斑点杂交法测定培养细胞IL-2 mRNA的含量
(二)原位杂交法测定TNF的mRNA
实验十 化学发光免疫分析
实验十一 HLA分型技术
一、微量淋巴细胞毒试验
二、DNA分型技术
实验十二 超敏反应
一、豚鼠过敏试验
二、血清中总IgE水平测定(酶联免疫吸附试验,ELISA)
三、血清中特异性IgE抗体的测定(酶联免疫吸附试验,ELISA)
四、肥大细胞脱颗粒试验
五、循环免疫复合物(IC)的检测
(一)PEG环状沉淀试验
(二)直接PEG沉淀试验
六、迟发型超敏反应(皮肤试验)
(一)结核菌素(OT)试验
(二)PHA皮肤试验
实验十三 多克隆抗体的制备及纯化
一、伤寒杆菌(颗粒性抗原)抗血清的制备
二、溶血素(颗粒性抗原)的制备
三、抗人IgG(可溶性抗原)免疫血清的制备
实验十四 单克隆抗体的制备
一、小鼠骨髓瘤细胞的准备
(一)小鼠骨髓瘤细胞株
(二)小鼠骨髓瘤细胞株的保存
(三)小鼠骨髓瘤细胞的培养
二、免疫B淋巴细胞的准备
(一)免疫动物
(二)免疫效果检测
三、细胞融合
(一)收集骨髓瘤细胞
(二)收集B淋巴细胞
(三)细胞融合
四、融合细胞的接种与选择性培养
(一)饲养细胞的准备
(二)接种
五、杂交瘤细胞的检测
(一)固相酶联免疫测定
(二)放射免疫测定
(三)荧光免疫测定法
(四)其它方法
六、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养
(一)有限稀释法
(二)半固体培养基法
七、杂交瘤细胞的扩增与冻存
八、单克隆抗体性质的鉴定
(一)特异性
(二)亲和常数
(三)单克隆抗体的免疫球蛋白(Ig)类和亚类鉴定
(四)结合位点
九、单克隆抗体的生产
……
内容摘要
本书系统地介绍了免疫学实验技术的基础知识、基本理论和基本技能。全书共分16个实验,内容包括:凝集反应、沉淀反应、补体参与的免疫反应、免疫标记技术、免疫印迹、免疫细胞的分离与纯化、细胞免疫功能测定、流式细胞测定技术、细胞因子及其受体的检测、化学发光免疫分析、HLA分型技术、超敏反应、多克隆抗体的制备、单克隆抗体的制备、抗体的纯化和非特异性免疫实验等。书中详细介绍了上述实验的原理、材料、方法及实验注意事项,内容丰富、知识性强。本书可作为基础医学、临床医学、口腔医学、预防医学、护理学、药学及生物学等专业的免疫学实验教材,同时也可作为从事免疫学及相关研究人员的参考用书。
精彩内容
本书系统地介绍了免疫学实验技术的基础知识、基本理论和基本技能。全书共分16个实验,内容包括:凝集反应、沉淀反应、补体参与的免疫反应、免疫标记技术、免疫印迹、免疫细胞的分离与纯化、细胞免疫功能测定、流式细胞测定技术、细胞因子及其受体的检测、化学发光免疫分析、HLA分型技术、超敏反应、多克隆抗体的制备、单克隆抗体的制备、抗体的纯化和非特异性免疫实验等。书中详细介绍了上述实验的原理、材料、方法及实验注意事项,内容丰富、知识性强。本书可作为基础医学、临床医学、口腔医学、预防医学、护理学、药学及生物学等专业的免疫学实验教材,同时也可作为从事免疫学及相关研究人员的参考用书。
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