白桦抗旱耐盐和次生壁形成的分子机理
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全新
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作者国会艳,杨传平,王玉成著
出版社科学出版社
ISBN9787030455093
出版时间2014-03
装帧平装
开本其他
定价68元
货号8559429
上书时间2024-12-17
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目录
目录
前言
1绪论1
1.1植物基因启动子的研究进展1
1.1.1启动子的结构和功能1
1.1.2启动子的分类1
1.2植物转录因子的研究2
1.2.1转录因子的结构和分类2
1.2.2转录因子的活性4
1.2.3转录因子的功能4
1.2.4MYB转录因子的研究进展6
1.3本研究的目的和意义8
2白桦BplMYB46基因的表达研究10
2.1实验材料10
2.1.1植物材料10
2.1.2载体与菌株10
2.1.3主要试剂10
2.1.4药品及培养基制备11
2.2实验方法12
2.2.1BplMYB46转录因子的亚细胞定位12
2.2.2白桦BplMYB46基因分析16
2.2.3白桦BplMYB46基因的表达16
2.2.4BplMYB46启动子序列分析18
2.2.5BplMYB46启动子的时空表达分析18
2.3结果与分析22
2.3.1BplMYB46转录因子的亚细胞定位22
2.3.2白桦BplMYB46基因分析24
2.3.3白桦BplMYB46基因的表达24
2.3.4pCAMBIA1301-BplMYB46启动子序列元件分析27
2.3.5BplMYB46启动子的时空表达28
2.4讨论30
2.5本章小结31
3白桦BplMYB46基因的功能研究33
3.1实验材料33
3.1.1植物材料33
3.1.2载体与菌株33
3.1.3试剂33
3.1.4溶液及培养基制备34
3.2实验方法35
3.2.1BplMYB46基因植物过表达载体的构建和工程菌的制备35
3.2.2BplMYB46基因对白桦的遗传转化40
3.2.3BplMYB46转基因白桦在非生物胁迫下的抗逆分析42
3.2.4BplMYB46基因在白桦次生壁合成中的功能分析46
3.3结果与分析48
3.3.1BplMYB46基因植物表达载体的构建和工程菌的制备48
3.3.2转基因白桦的筛选与检测52
3.3.3BplMYB46转基因白桦苗非生物胁迫下的抗逆分析54
3.3.4BplMYB46基因在白桦次生壁合成中的功能分析65
3.4讨论69
3.5本章小结71
4BplMYB46转录激活结构域和同源蛋白的互作研究73
4.1实验材料73
4.1.1菌株与载体73
4.1.2常用试剂73
4.1.3药品及培养基制备73
4.2实验方法75
4.2.1BplMYB46转录因子转录激活结构域的研究75
4.2.2BplMYB46转录因子与同源基因互作的研究78
4.3结果与分析81
4.3.1BplMYB46转录因子转录激活结构域分析81
4.3.2BplMYB46转录因子与同源蛋白的互作83
4.4讨论86
4.5本章小结87
5BplMYB46识别顺式作用元件的研究89
5.1实验材料89
5.1.1菌株与载体89
5.1.2主要试剂89
5.1.3药品及培养基制备90
5.2实验方法91
5.2.1BplMYB46识别顺式作用元件的研究91
5.2.2BplMYB46与顺式作用元件的互作验证100
5.2.3染色质免疫共沉淀(ChIP)技术分析BplMYB46与下游基因的互作106
5.3结果与分析109
5.3.1BplMYB46识别顺式作用元件的分析109
5.3.2BplMYB46与顺式作用元件互作分析114
5.3.3ChIP实验结果分析117
5.4讨论118
5.5本章小结120
6BplMYB46调控下游基因的表达分析121
6.1实验材料121
6.1.1植物材料121
6.1.2常用试剂121
6.1.3溶液配制121
6.2实验方法121
6.2.1RNA的提取与反转录121
6.2.2数字基因表达谱文库的构建和测序122
6.2.3数据的处理122
6.2.4测序评估122
6.2.5基因表达量统计123
6.2.6差异表达基因筛选123
6.2.7RT-PCR方法验证表达谱测序结果123
6.3结果与分析125
6.3.1表达谱测序结果评估125
6.3.2差异表达基因分析129
6.3.3RT-PCR验证表达谱结果131
6.4讨论132
6.5本章小结133
7讨论与展望134
7.1讨论134
7.2展望136
参考文献137
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《白桦抗旱耐盐和次生壁形成的分子机理》可供林学专业的本科生、研究生学习参考,也可以作为林业院校和师范院校林木遗传育种、分子生物技术等相关专业研究生的科研参考书。
精彩内容
《白桦抗旱耐盐和次生壁形成的分子机理》行BplMYB46转录因子的核定位;分析该基因是否被胁迫诱导以及在不同部位的表达。克隆启动子,进行顺式元件分析,检测其活性;构建过表达和抑制表达载体,转基因后进行胁迫处理,根据表型、组化、生理指标、解剖学以及SOD等基因的表达确定BplMYB46基因是否具有抗逆性和在调控次生壁形成中的功能;分析其是否有转录激活活性以及与同源的白桦MYB的互作;构建*元件库,酵母单杂交筛选与其互作的元件;利用表达谱技术分析BplMYB46调控的下游代谢途径及靶基因。*后,确定白桦BplMYB46基因在响应非生物胁迫和次生细胞壁形成中的功能及调控机制,为白桦的遗传改良奠定基础。
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