基因操作技术/彭加平
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北京东城
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作者彭加平//田锦
出版社化学工业出版社
ISBN9787122161062
出版时间2013-03
装帧平装
开本其他
定价26元
货号1200460153
上书时间2024-09-19
商品详情
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目录
项目一基因操作安全及防护
【学习目标】
※ 项目说明
※ 推荐知识
一、基因操作概述
二、基因操作安全及生物安全操作规范
※ 项目实施
任务1.1基因操作常用有毒化学试剂的选择及其防护
任务1.2基因操作常见仪器设备的选择与使用
任务1.3基因操作生物危害废品的处理
【知识要点】
【技能要点】
※ 能力拓展
一、实训室用电安全及触电急救
二、实训室火灾预防及烧伤急救
三、实训室标准操作规程的撰写
【实践练习】
项目二基因操作常用溶液及培养基配制
【学习目标】
※ 项目说明
※ 推荐知识
一、化学试剂的规格和生物试剂的分类
二、溶液浓度的表示、调整和互换
三、溶液的配制
四、生物实验室玻璃器皿的洗涤
※ 项目实施
任务2.1常用溶液和抗生素的配制
任务2.2细菌常用培养基及配制
【知识要点】
【技能要点】
※ 能力拓展
一、试剂盒
二、基因操作过程中的微量操作
三、基因操作实训报告的撰写
【实践练习】
项目三细菌基因组DNA的制备
【学习目标】
※ 项目说明
※ 推荐知识
一、核酸的理化性质
二、核酸的分离提取原理
三、基因的概念、结构与表达
※ 项目实施
任务3.1操作准备
任务3.2SDS法制备细菌基因组DNA
任务3.3CTAB法制备细菌基因组DNA
任务3.4煮沸法制备细菌基因组DNA
【知识要点】
【技能要点】
※ 能力拓展
一、动物基因组DNA的提取
二、血液基因组DNA的提取
三、植物基因组DNA的提取
四、酵母基因组DNA的提取
五、总RNA和mRNA的提取
六、核酸固相抽提方法
【实践练习】
项目四PCR扩增目的基因――大肠杆菌
丝氨酸羟甲基转移酶基因（glyA）
【学习目标】
※ 项目说明
※ 推荐知识
一、PCR扩增原理
二、Taq聚合酶
三、PCR引物设计原则
四、PCR反应体系的组成及条件优化
五、常用PCR技术
六、PCR技术应用81※ 项目实施
任务4.1操作准备
任务4.2基于glyA基因的引物设计
任务4.3PCR扩增glyA基因
【知识要点】
【技能要点】
※ 能力拓展
一、常见生物信息数据库（软件）介绍及使用
二、构建基因文库获得目的基因
三、用反转录PCR扩增目的DNA
【实践练习】
项目五质粒PET30a的小量制备
【学习目标】
※ 项目说明
※ 推荐知识
一、质粒的一般特性
二、质粒的分类和命名
三、理想质粒载体的推荐条件
四、常用的质粒载体98※ 项目实施
任务5.1操作准备
任务5.2用碱裂解法小量制备质粒pET30a
任务5.3用紫外分光光度法测定pET30a的浓度和纯度
任务5.4质粒pET30a的纯化
【知识要点】
【技能要点】
※ 能力拓展
一、表达载体
二、阅读质粒载体图谱
【实践练习】
项目六琼脂糖凝胶电泳检测染色体DNA、
PCR产物及质粒pET30a
【学习目标】
※ 项目说明
※ 推荐知识
一、琼脂糖凝胶电泳的基本原理
二、影响琼脂糖凝胶DNA迁移速率的因素
※ 项目实施
任务6.1操作准备
任务6.2琼脂糖凝胶电泳检测染色体DNA、PCR产物及质粒pET30a
任务6.3从低熔点琼脂糖凝胶中回收质粒pET30a
【知识要点】
【技能要点】
※ 能力拓展
一、琼脂糖凝胶电泳带谱的拍摄及处理技术
二、随机扩增多态性DNA（RAPD）
【实践练习】
项目七重组质粒的制备将丝氨酸羟甲基转
移酶基因（glyA）克隆至质粒pET30a
【学习目标】
※ 项目说明
※ 推荐知识
一、性核酸内切酶
二、DNA连接酶
三、DNA甲基化酶
四、其他工具酶
※ 项目实施
任务7.1操作准备
任务7.2用BamHⅠ和NdeⅠ酶切PCR产物（glyA）和质粒pET30a
任务7.3用T DNA连接酶将glyA和pET30a连接形成重组质粒
【知识要点】
【技能要点】
※ 能力拓展
一、酵母表达系统
二、性片段长度多态性（RFLP）
【实践练习】
项目八将含glyA基因的重组质粒
转化至大肠杆菌DH5α
【学习目标】
※ 项目说明
※ 推荐知识
一、感受态
二、转化
三、重组子的筛选
※ 项目实施
任务8.1操作准备
任务8.2大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备
任务8.3用热激法将含glyA的重组质粒转化至大肠杆菌DH5α
任务8.4用电击法将含glyA的重组质粒转化至大肠杆菌DH5α
【知识要点】
【技能要点】
※ 能力拓展
一、基因打靶技术
二、转基因技术
三、农杆菌介导转化技术
【实践练习】
项目九重组子的鉴定及基因表达产物分析
【学习目标】
※ 项目说明
※ 推荐知识
一、聚丙烯酰胺凝胶电泳
二、SDS.聚丙烯酰胺凝胶电泳
三、核酸分子杂交
※ 项目实施
任务9.1操作准备
任务9.2重组质粒的酶切鉴定
任务9.3重组质粒的Southern印迹杂交鉴定
任务9.4目的基因（glyA）的诱导表达
任务9.5表达产物的SDS.PAGE分析
【知识要点】
【技能要点】
※ 能力拓展
一、等电聚焦电泳
二、DNA芯片技术
【实践练习】
参考文献
内容摘要
彭加平、田锦主编的《基因操作技术(高职高专十二五规划教材)》为项目化教学改革配套教材，具体以大肠杆菌丝氨酸羟甲基转移酶基因(glyA)的克隆和表达为任务目标，按照基因工程的操作流程将相关知识和技能分解为前后连贯的9个项目、31项任务，涉及的主要内容包括核酸的分离纯化技术、PCR技术、DNA体外重组技术、琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术、分子杂交技术、基因操作安全及防护技术，以及基因操作常用溶液及试剂配制方法等。全书突出技术原理和操作技能的有机融合，深入浅出，图文并茂，便于学生“做中学”和“学中做”，适合项目载体、任务驱动的行动导向教学。
《基因操作技术(高职高专十二五规划教材)》可作为高职高专生物技术及应用、生物制药技术、食品生物技术及相关专业师生的教材，也可供制药、食品企业相关技术人员参考。
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