• 微生物生物技术——细菌系统实验指南
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微生物生物技术——细菌系统实验指南

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作者编者:(印)S.待仕//H.R.达什|译者:朱必凤//廖益//杨旭夫//许崇波//周迪等

出版社科学出版社

ISBN9787030576569

出版时间2018-08

装帧平装

开本16开

定价118元

货号1201748007

上书时间2024-12-23

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品相描述:全新
商品描述
作者简介

S.待仕于2009年以来在印度奥里萨邦鲁尔克拉市国家技术学院生命科学部任助理教授。此前,他曾在印度友好大学北方邦诺伊达友好生物技术研究所工作。他获得了印度泰米尔纳德邦阿米提大学海洋生物学不错研究中心海洋生物学(微生物学)博士学位。


H.R.达什是印度奥里萨邦鲁尔克拉市国家技术学院生命科学部环境微生物学实验室和生态学实验室的不错研究员。


目录
  
第1章 细菌分子微生物学基础 1


实验1.1 基因组DNA的分离 1


导言 1


原理 1


所需试剂及其作用 2


操作步骤 3


观察 4


结果表格 4


疑难问题和解决方案 4


注意事项 5


操作流程 5


实验1.2 细菌裂解物的制备 6


导言 6


原理 7


操作步骤 8


观察 9


结果表格 10


疑难问题和解决方案 10


注意事项 10


操作流程 11


实验1.3 质粒的分离 13


导言 13


原理 14


所需试剂及其作用 15


操作步骤 16


观察 17


结果表格 17


疑难问题和解决方案 17


注意事项 17


操作流程 18


实验1.4 细菌总RNA的分离 19


导言 19


原理 19


所需试剂及其作用 20


操作步骤 21


观察 22


结果表格 22


疑难问题和解决方案 23


注意事项 23


操作流程 23


实验1.5 16S rRNA基因的扩增 24


导言 24


原理 26


所需试剂及其作用 27


操作步骤 28


观察 30


疑难问题和解决方案 30


注意事项 30


操作流程 31


实验1.6 琼脂糖凝胶电泳 31


导言 31


原理 32


所需试剂及其作用 33


操作步骤 35


观察 36


疑难问题和解决方案 37


注意事项 37


操作流程 37


第2章 克隆与转化 39


实验2.1 感受态细胞制备和热激转化 39


导言 39


原理 40


所需试剂及其作用 41


操作步骤 41


观察 43


疑难问题和解决方案 43


注意事项 43


操作流程 44


实验2.2 电穿孔 45


导言 45


原理 46


所需试剂及其作用 47


操作步骤 48


观察 49


结果表格 49


疑难问题和解决方案 49


注意事项 50


操作流程 50


实验2.3 性内切核酸酶消化和连接 51


导言 51


原理 51


所需试剂及其作用 55


操作步骤 56


观察 57


疑难问题和解决方案 58


注意事项 58


操作流程 58


实验2.4 克隆所需合适载体系统的选择 59


导言 59


克隆载体的不同类型 62


选择合适克隆载体的标准 66


结论 68


实验2.5 蓝-白斑筛选验证转化 69


导言 69


原理 69


所需试剂及其作用 70


操作步骤 71


观察 72


疑难问题和解决方案 72


注意事项 73


操作流程 73


实验2.6 PCR验证克隆 74


导言 74


原理 74


所需试剂及其作用 76


操作步骤 77


观察 78


疑难问题和解决方案 78


注意事项 78


操作流程 79


第3章 分子微生物学优选技术 80


实验3.1 cDNA的合成 80


导言 80


原理 80


所需试剂及其作用 82


操作步骤 83


观察 85


疑难问题和解决方案 85


注意事项 85


操作流程 86


实验3.2 qRT-PCR分析基因表达 86


导言 86


原理 87


所需试剂及其作用 89


操作步骤 90


疑难问题和解决方案 92


注意事项 93


操作流程 93


实验3.3 用报道基因方法进行基因表达分析 93


导言 94


原理 94


所需试剂及其作用 95


操作步骤 96


观察 97


疑难问题和解决方案 97


注意事项 97


操作流程 97


实验3.4 基因表达半定量分析 98


导言 98


原理 99


所需试剂及其作用 100


操作步骤 101


观察 103


观察表格 103


疑难问题和解决方案 104


注意事项 104


操作流程 105


实验3.5 Northern印迹 105


导言 105


原理 106


所需试剂及其作用 108


操作步骤 109


观察 111


疑难问题和解决方案 111


注意事项 111


操作流程 111


实验3.6 宏基因组DNA的分离 113


导言 113


原理 113


所需试剂及其作用 115


操作步骤 116


观察 116


结果表格 117


疑难问题和解决方案 117


注意事项 117


操作流程 117


实验3.7 细菌细胞质粒消除 118


导言 118


原理 119


所需试剂及其作用 120


操作步骤 121


观察 121


结果表格 121


疑难问题和解决方案 121


注意事项 121


操作流程 122


实验3.8 细菌接合 122


导言 122


原理 123


所需试剂及其作用 124


操作步骤 125


观察 125


结果表格 126


疑难问题和解决方案 126


注意事项 126


操作流程 126


实验3.9 细菌转导 127


导言 127


原理 128


所需试剂及其作用 129


操作步骤 130


观察 131


结果表格 131


疑难问题和解决方案 131


注意事项 131


操作流程 131


第4章 分子微生物多样性 133


实验4.1 质粒图谱分析 133


导言 133


原理 133


所需试剂及其作用 134


操作步骤 136


观察 139


结果表格 139


疑难问题和解决方案 140


注意事项 140


操作流程 140


实验4.2 扩增核糖体DNA性分析研究细菌相关性 142


导言 142


原理 142


所需试剂及其作用 143


操作步骤 145


观察 149


结果表格 149


疑难问题和解决方案 150


注意事项 150


操作流程 150


实验4.3 变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析对宏基因组细菌多态性研究 152


导言 152


原理 152


所需试剂及其作用 153


操作步骤 154


观察 158


结果表格 158


疑难问题和解决方案 158


操作流程 159


实验4.4 脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析 159


导言 160


原理 161


所需试剂及其作用 162


操作步骤 163


观察 165


结果表格 165


疑难问题和解决方案 165


注意事项 166


操作流程 166


实验4.5 细菌多重PCR快速检测 168


导言 168


原理 169


所需试剂及其作用 169


操作步骤 171


观察 171


结果表格 171


疑难问题和解决方案 172


注意事项 172


操作流程 172


实验4.6 肠杆菌基因间重复共有序列和细菌基因外重复回文序列PCR技术 173


导言 173


原理 174


所需试剂及其作用 175


操作步骤 177


观察 179


结果表格 179


疑难问题和解决方案 179


注意事项 180


操作流程 180


第5章 分子微生物学计算机辅助研究 181


实验5.1 基因序列分析 181


导言 181


样品序列分析工具 181


原理 181


操作步骤 182


操作流程 187


实验5.2 基因库序列的递交 188


导言 188


原理 188


操作步骤 189


操作流程 194


实验5.3 系统发育树 194


导言 194


解读树 195


系统发育树软件 195


原理 195


操作步骤 197


操作流程 201


实验5.4 引物设计 201


导言 201


用软件设计引物 202


引物设计指南 203


使用NetPrimer软件设计引物程序 203


操作流程 206


第6章 分子微生物学的应用 207


实验6.1 细菌生物膜在玻璃管中的形成 207


导言 207


原理 208


所需试剂及其作用 209


操作步骤 209


观察 209


结果表格 210


疑难问题和解决方案 210


注意事项 211


操作流程 211


实验6.2 微孔板中细菌生物膜形成的筛选 212


导言 212


原理 213


所需试剂及其作用 213


操作步骤 214


观察 214


结果表格 214


疑难问题和解决方法 215


注意事项 215


操作流程 216


实验6.3 生物膜共聚焦激光扫描显微镜分析 217


导言 217


原理 218


所需试剂及其作用 219


操作步骤 220


观察 221


结果表格 221


注意事项 222


疑难问题和解决方案 222


操作流程 222


实验6.4 细菌生物膜荧光显微镜和图像分析 223


导言 223


原理 223


所需试剂及其作用 224


操作步骤 225


结果表格 228


注意事项 228


操作流程 228


实验6.5 生物表面活性剂的筛选 229


导言 229


原理 230


所需试剂及其作用 231


操作步骤 231


观察 232


结果表格 232


操作流程 232


实验6.6 多环芳烃细菌生物治理的光谱光度分析 233


导言 233


原理 233


所需试剂及其作用 234


操作步骤 235


观察 235


结果表格 236


注意事项 236


操作流程 236


实验6.7 筛选金属富集细菌的硫化氢实验 237


导言 237


原理 237


所需试剂及其作用 238


操作步骤 239


观察 239


结果表格 240


疑难问题和解决方案 240


注意事项 240


操作流程 240


参考文献 242


进一步读物 243


内容摘要
本书对每个实验的操作,各种试剂的作用功能都进行了描述。同时对实验中出现的问题进行了详尽的分析并有很好详细的解决办法。对学生和研究人员有巨大的帮助。另外书中很好详尽描述了实验操作的步骤和程序,任何学生、研究生和技术人员都可以完成实验,也给操作和研究人员带来了成功的希望。同时还描述了利用现代软件如何对实验结果进行分析,对于学生学到知识和提高动手能力和总结实验结果发表论文有很大帮助。本书既有常规的生物技术实验,也融入了现在的优选生物技术实验如宏基因组学试验,既有理论研究实验,又有应用型研究实验比如筛选用于环境修复的微生物等。不管对于初学者还是对于研究人员都具有很好好的应用价值。

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