谷糠活性蛋白FMBP的发现与靶向抗结直肠癌机理研究

国内外研究显示，植物源抗肿瘤活性蛋白具有活性高、靶点明确、特异性强及毒性低等优点，是一类极具发展前景的肿瘤治疗药物。因此，从植物中提取具有抗肿瘤功能的活性蛋白，进而开发成抗肿瘤产品成为当下医学领域的研究热点。谷子属一年生禾本科植物，起源于我国黄河流域，是我国的主要粮食作物。谷子副产品谷糠蛋白质含量丰富，过敏性低，营养价值较高，是一类优质的蛋白质资源，具有很好的医药开发潜力，但目前关于谷糠蛋白在抗肿瘤活性方面的研究尚属空白。本书以谷糠抗肿瘤活性蛋白FMBP的发现及抗结直肠癌机理为主线，首次翔实地介绍了FMBP的发现过程、生物学特性、抗结直肠癌潜力及靶向作用机理等，揭示了FMBP具有研发为靶向抗结直肠癌药物的应用潜力。

本书共包括11章，第1章主要介绍了植物源抗肿瘤活性蛋白的研究现状、临床应用前景及谷糠蛋白的营养价值、医药功效；第2章介绍了谷糠抗肿瘤活性蛋白（FMBP）的发现历程；第3章介绍了FMBP对结直肠癌细胞增殖及细胞凋亡的影响；第4章介绍了FMBP通过诱导细胞氧化应激发挥靶向抗结直肠癌作用；第5章介绍了FMBP对癌细胞迁移的影响；第6~7章从体内验证了FMBP对裸鼠皮下结直肠癌模型和炎症相关结直肠癌小鼠模型肿瘤生长的抑制效应；第8~9章介绍了FMBP能够通过阻断甘油磷脂代谢路径抑制炎症相关结直肠癌细胞生长；第10章揭示了FMBP抗结直肠癌效应的分子靶点；第11章介绍了重组FMBP的克隆、构建及原核表达纯化过程，证明重组FMBP的抗结直肠癌活性。本书为谷糠活性蛋白FMBP未来开发为新型结直肠癌靶向药物及相关结直肠癌化疗增敏药物制剂提供了理论依据。书中部分图片嵌入下列二维码中，读者扫码即可参阅。

本书的出版得到了国家自然科学基金青年科学基金项目（31500630）、山西省青年科技研究基金项目（2015021200）及山西省高校科技创新计划项目（2015175）的支持。在项目研究期间得到山西大学李卓玉教授的悉心指导、大力支持和帮助，在此表示衷心的感谢！由于水平和时间所限，本书疏漏之处在所难免，恳请专家、读者提出宝贵意见，以使本书不断完善。

单树花

2022年2月

本书以谷糠抗肿瘤活性蛋白FMBP的发现及抗结直肠癌机理为主线，首次翔实地介绍了谷糠源活性蛋白FMBP的发现过程、生物学特性及体内外抗结直肠癌潜力，揭示了FMBP抗结直肠癌效应的靶向作用机理，构建了重组FMBP的克隆及原核工程菌表达系统，并发现其除了具有抗结直肠癌活性外，还具有使肿瘤化疗增敏的效果。该研究成果在国际上首次揭示了FMBP在预防和治疗结直肠癌疾病方面具有潜在的临床应用前景，旨在为其今后研发为新型结直肠癌靶向药物及相关结肠直癌化疗增敏药物制剂提供理论依据。本书可供从事生物及医药类研发的技术人员参考，也可供大专院校生物技术、药学等相关专业的师生阅读。

本书以谷糠抗肿瘤活性蛋白FMBP的发现及抗结直肠癌机理为主线，首次翔实地介绍了谷糠源活性蛋白FMBP的发现过程、生物学特性及体内外抗结直肠癌潜力，揭示了FMBP抗结直肠癌效应的靶向作用机理，构建了重组FMBP的克隆及原核工程菌表达系统，并发现其除了具有抗结直肠癌活性外，还具有使肿瘤化疗增敏的效果。该研究成果在国际上首次揭示了FMBP在预防和治疗结直肠癌疾病方面具有潜在的临床应用前景，旨在为其今后研发为新型结直肠癌靶向药物及相关结肠直癌化疗增敏药物制剂提供理论依据。本书可供从事生物及医药类研发的技术人员参考，也可供大专院校生物技术、药学等相关专业的师生阅读。

第1章绪论001

1.1　植物蛋白概述001

1.2　植物源抗肿瘤活性蛋白的研究进展002

1.3　植物源蛋白的抗肿瘤效应机制004

1.4　植物抗肿瘤蛋白的临床应用现状010

1.5　谷子及其副产物谷糠的营养价值011

1.6　国内外谷子及谷糠蛋白质的研究现状012

参考文献014

第2章谷糠抗肿瘤活性蛋白（FMBP）的发现及鉴定023

2.1　FMBP 的分离纯化及生物学特性表征方法024

2.2　谷糠蛋白FMBP 的纯化鉴定及抗结直肠癌活性029

参考文献034

第3章FMBP 在细胞模型上的抗结直肠癌活性037

3.1　FMBP 影响细胞周期及细胞增殖能力的检测方法038

3.2　FMBP 对细胞凋亡诱导能力的检测方法041

3.3　FMBP 通过诱导细胞周期阻滞抑制结直肠癌细胞增殖043

3.4　FMBP 通过caspases 依赖的路径诱导结直肠癌细胞凋亡046

参考文献052

第4章FMBP 通过诱导细胞氧化应激发挥靶向抗结直肠癌作用055

4.1　ROS 抑制剂（NAC）逆转FMBP 抗结直肠癌活性的检测方法056

4.2　FMBP 干预细胞内氧化应激相关指标的测定方法057

4.3　FMBP 抑制结直肠癌细胞存活和集落形成能力060

4.4　FMBP 诱导了结直肠癌细胞的氧化应激效应061

4.5　FMBP 靶向抗结直肠癌效应的作用机理067

参考文献068

第5章FMBP 抑制结直肠癌细胞迁移的作用及机理073

5.1　FMBP 干预结直肠癌细胞迁移能力的检测方法073

5.2　筛选过表达STAT3 基因的DLD1 稳定株的方法075

5.3　FMBP 通过抑制STAT3 介导的EMT 效应发挥抗结直肠癌迁移效应078

5.4　FMBP 抑制结直肠癌细胞迁移效应的分子机理083

参考文献084

第6章FMBP 在裸鼠体内的抗结直肠癌效应研究088

6.1　在裸鼠模型中验证FMBP 抗结直肠癌效应的检测方法088

6.2　FMBP 对裸鼠皮下肿瘤生长的抑制效应090

参考文献095

第7章FMBP 对小鼠炎症相关结直肠癌（CAC）的抑制效应096

7.1　FMBP 抑制小鼠CAC 生长的检测方法096

7.2　FMBP 对小鼠CAC 生长的抑制效应098

参考文献103

第8章FMBP 对CAC 小鼠甘油磷脂（GPL）代谢的调控效应105

8.1　FMBP 干预CAC 小鼠代谢路径的分析方法106

8.2　FMBP 抑制CAC 小鼠的GPL 代谢路径107

参考文献114

第9章细胞水平验证FMBP 调控甘油磷脂代谢的效应机理117

9.1　GPL 代谢酶抑制剂影响结直肠癌细胞活力的检测方法117

9.2　FMBP 干预结直肠癌细胞GPL 代谢相关指标的检测方法118

9.3　NAC 干预结直肠癌细胞内GPL 代谢的检测方法120

9.4　FMBP 抑制结直肠癌细胞的GPL 代谢121

9.5　NAC 能够逆转FMBP 对GPL 代谢的抑制效应125

9.6　FMBP 通过重塑GPL 代谢抑制结直肠癌的效应机理127

参考文献129

第10章FMBP 抗结直肠癌效应的分子靶点研究131

10.1　FMBP 抗结直肠癌分子靶点的鉴定方法131

10.2　FMBP 结合csGRP78 调控下游信号通路的分析方法135

10.3　体内验证csGRP78 是FMBP 抗结直肠癌分子靶点的测定方法136

10.4　csGRP78 是FMBP 抗结直肠癌效应的分子靶点137

10.5　FMBP 通过结合结直肠癌细胞膜表面的csGRP78 抑制STAT3 的磷酸化145

10.6　体内验证csGRP78 是FMBP 抗结直肠癌的分子靶点147

10.7　FMBP 结合csGRP78 发挥抗结直肠癌效应的分子机制150

参考文献151

第11章重组谷糠过氧化物酶FMBP 的克隆、表达及抗结直肠癌活性154

11.1　重组FMBP（Re-FMBP）的构建、克隆表达及纯化方法155

11.2　Re-FMBP 抗结直肠癌活性鉴定方法159

11.3　重组FMBP 的构建、克隆表达及纯化结果分析161

参考文献165

本书以谷糠抗肿瘤活性蛋白FMBP的发现及抗结直肠癌机理为主线，首次翔实地介绍了谷糠源活性蛋白FMBP的发现过程、生物学特性及体内外抗结直肠癌潜力，揭示了FMBP抗结直肠癌效应的靶向作用机理，构建了重组FMBP的克隆及原核工程菌表达系统，并发现其除了具有抗结直肠癌活性外，还具有使肿瘤化疗增敏的效果。该研究成果在国际上首次揭示了FMBP在预防和治疗结直肠癌疾病方面具有潜在的临床应用前景，旨在为其今后研发为新型结直肠癌靶向药物及相关结肠直癌化疗增敏药物制剂提供理论依据。本书可供从事生物及医药类研发的技术人员参考，也可供大专院校生物技术、药学等相关专业的师生阅读。

1.科学系统 本书以谷糠抗肿瘤活性蛋白FMBP的发现及抗结直肠癌机理为主线，首次翔实地介绍了谷糠源活性蛋白FMBP的发现过程、生物学特性及体内外抗结直肠癌潜力，揭示了FMBP抗结直肠癌效应的靶向作用机理，学术水平高；2.前瞻性强 本书首次揭示了FMBP在预防和治疗结直肠癌疾病方面具有潜在的临床应用前景，旨在为其今后研发为新型结直肠癌靶向药物及相关结直肠癌化疗增敏药物制剂提供理论依据；3.开拓思路 本书可供从事生物及医药类研发的技术人员参考，可以供大专院校生物技术、药学等相关专业的师生阅读。