动物细胞培养——基本技术和特殊应用指南（原书第7版）

图书标准信息

• 作者 Freshney 著；R.Ian、章静波 徐存拴 译
• 出版社 科学出版社
• 出版时间 2019-02
• 版次 1
• ISBN 9787030603593
• 定价 328.00元
• 装帧 平装
• 开本 16开
• 纸张 铜版纸
• 页数 800页
• 字数 1185千字
• 丛书 生命科学实验指南系列

【内容简介】

自本书第 6 版发行以来，细胞培养领域已取得诸多进展，第 7 版除保留基本内容（培养细胞的生物学、细胞培养实验室的设计与布局、培养器 皿与培养基、原代培养、细胞系及其鉴定、污染、分化、老化、永生化等） 之外，特别强化了某些章节的内容，尤其见于3D 培养、干细胞、特殊类型 细胞培养、STR 测序、规模化培养等的介绍，因此第7 版无论是在理论上还 是在技术上均更具新颖性和实用性。

 

【作者简介】

本书作者R.Ian Freshney是英国格拉斯哥大学癌症科学荣誉资深研究员，迄今出版多部专著，是细胞培养技术领域的世界著名专家。

【目录】

图片
表格
方案
短篇综述
章 绪论 1
1.1历史背景 2
1.2组织培养的优点 10
1.2.1环境控制 10
1.2.2样品的特征和均一 11
1.2.3经济、规模和机械化 11
1.2.4体内环境的体外模拟 11
1.3局限 11
1.3.1专业技能 11
1.3.2量的问题 12
1.3.3去分化和选择 12
1.3.4细胞的起源 13
1.3.5不稳定 13
1.4体外的主要差异 13
1.5组织培养的类型 14
参文献 16
第2章 培养细胞的生物学 21
2.1细胞培养环境 21
2.2细胞黏附 21
2.2.1细胞黏附分子 22
2.2.2细胞间连接 23
2.2.3细胞骨架 24
2.2.4细胞外基质 24
2.2.5细胞迁移 25
2.3细胞增殖 26
2.3.1细胞周期 26
2.3.2细胞增殖调控 27
2.4细胞分化 27
2.4.1细胞分化的谤导和保持 30
2.4.2细胞分化及去分化潜能 31
2.5细胞信号转导 32
2.6能量代谢 34
2.7培养细胞的起源 34
2.7.1培养的开始 35
2.7.2细胞系的演化 36
2.7.3细胞的衰老 36
2.7.4连续细胞系的转化和建立 36
2.8术语定义 38
参文献 39
第3章 实验室设计及布局 42
3.1布局、陈设和服务设施 42
3.1.1条件 44
3.1.2服务 48
3.1.3通风装置 48
3.2设计与布局 49
3.2.1无菌作区 49
3.2.2层流柜 50
3.2.3工作台 50
3.2.4检疫和范 50
3.2.5培养 51
3.2.6准备区 54
3.2.7储存 55
3.3灾害管理 57
参文献 58
第4章 设备和材料 59
4.1组织培养实验室的要求 59
4.2无菌工作区 61
4.2.1层流生物安全柜 61
4.2.2手推车 63
4.2.3无菌液体处理——移液和分液 63
4.2.4倒置显微镜 69
4.2.5照相机和监视器 71
4.2.6解剖显微镜 71
4.2.7离心机 71
4.2.8细胞 72
4.3孵育和培养 73
4.3.1恒温箱 73
4.3.2湿式c07培养箱 73
4.3.3温度记录仪 76
4.3.4滚筒支架 76
4.3.5磁力搅拌器 77
4.3.6培养器皿 77
4.4准备和 78
4.4.1洗涤 78
4.4.2培养基和试剂的制备 79
4.4.3 80
4.5储存 82
4.5.1耗材 82
4.5.2冰箱和冷冻箱 82
4.5.3冻存容器 83
4.5.4程序降温仪 83
4.6实验室辅助设备 84
4.6.1计算机和网络 84
4.6.2正置显微镜 84
4.6.3低温冷冻箱 84
4.6.4共聚焦显微镜 85
4.6.5pcr热循环仪 85
4.7专用设备 85
4.7.1显微注装置 85
4.7.2菌落器 85
4.7.3离心式淘洗器 85
4.7.4沆式细胞仪 86
参文献 86
第5章 无菌技术 87
5.1无菌技术的目的 87
5.1.1污染风险 87
5.1.2维持无菌 88
5.2无菌环境的基本要素 89
5.2.1层流 90
5.2.2安静区域 91
5.2.3作台 92
5.2.4个人卫生 93
5.2.5试剂和培养基 94
5.2.6培养物 94
5.3无菌处理 94
5.3.1擦拭 94
5.3.2加盖 94
5.3.3灼烧 95
5.3.4试剂瓶和培养瓶的作 95
5.3.5移液 96
5.3.6大容量移液 97
5.3.7液体倾倒 97
5.4标准化作 97
5.4.1培养瓶和试剂瓶 103
5.4.2培养皿和多孔培养板 103
5.5仪器和设备 104
5.5.1冰箱和冷室 104
5.5.2恒温箱 104
5.5.3盒装培养物 106
5.5.4充入c07气体 106
参文献 107
第6章 安全、生物伦理及验证 108
6.1实验室安全 108
6.2危险评估 108
6.3标准作程序 110
6.4安全规则 110
6.5常规安全 112
6.5.1作者 112
6.5.2设备 113
6.5.3玻璃器皿和锐利物品 113
6.5.4化学毒 1 14
6.5.5气体 115
6.5.6液氮 116
6.5.7烧伤 116
6.6火 116
6.7电离辐 117
6.7.1摄入 117
6.7.2放废物的处理 117
6.7.3标记试剂的辐照 118
6.7.4高能源辐照 118
6.8生物危害 118
6.8.1生物范水 118
6.8.2生物安全柜(bsc) 121
6.8.3人体活检材料 123
6.8.4细胞系 125
6.8.5遗传作 126
6.8.6生物危险废物的处理 126
6.8.7净化和熏蒸 126
6.9生物伦理 127
6.9.1动物组织 127
6.9.2人体组织 127
6.10质量保证 129
6.10.1作程序 129
6.10.2质量控制(qc) 129
6.10.3确认 130
6.10.4身份验证 130
6.10.5起源 130
6.10.6污染 131
参文献 131
第7章 培养器皿和附着物 134
7.1附着物 134
7.1.1附着和生长 134
7.1.2常用的附着材料 134
7.1.3附着物替代品 135
7.2表面处理 136
7.2.1附着物包被 136
7.2.2饲养层 138
7.2.3非黏附着物 139
7.3培养器皿的选择 1 39
7.3.1细胞产量 140
7.3.2多孔板 141
7.3.3培养瓶和培养皿 142
7.3.4高细胞产量 143
7.3.5悬浮培养 144
7.3.6通气 144
7.3.7取样和分析 145
7.3.8不均匀生长 146
7.3.9成本 146
7.4特殊系统 147
7.4.1渗透支持物 147
7.4.2三维基质 148
参文献 148
第8章 成分明确培养基及补充物 151
8.1培养基的发展史 151
8.2物理化学特征 152
8.2.1ph 152
8.2.2c07和碳酸盐 1 53
8.2.3缓冲作用 155
8.2.4氧气 155
8.2.5渗透压 164
8.2.6温度 165
8.2.7黏度 166
8.2.8表面张力和成泡 166
8.3衡盐溶液 166
8.4接近培养基 167
8.4.1氨基酸 167
8.4.2维生素 168
8.4.3盐粪 169
8.4.4葡萄糖 169
8.4.5有机补充物 169
8.4.6激素和生长因子 169
8.4.7抗生素 170
8.5血清 170
8.5.1蛋白质 172
8.5.2生长因子 172
8.5.3激素 173
8.5.4营养物及代谢物 1 73
8.5.5脂类 173
8.5.6矿物质 173
8.5.7抑制物 173
8.6培养基和血清的选择 174
8.6.1血清批次预约 176
8.6.2血清的测试 176
8.6.3热灭活 177
8.7其他添加物 177
8.7.1氨基酸水解物 177
8.7.2浸出液 177
8.7.3适应培养基 177
8.8储存 178
参文献 178
第9章 无血清培养基 181
9.1血清的缺点 189
9.2无血清培养基的优点 190
9.3无血清培养基的缺点 190
9.4血清的替代 191
9.4.1无血清培养基的商业供应 191
9.4.2血清替代物 191
9.4.3无血清传代培养 193
9.4.4激素 193
9.4.5生长因子 194
9.4.6血清中的营养物质 194
9.4.7蛋白质和多聚胺 199
9.4.8黏度 199
9.5无血清培养基的研发 199
9.6无血清培养基的选择 200
9.6.1细胞或产物特异 200
9.6.2细胞系对无血清培养基的适应 200
9.7无血清培养基的制备 204
9.8无动物蛋白培养基 204
9.9小结 204
参文献 205
0章 准备与 209
10.1准备试剂与用品 209
10.2设备与液体的 209
10.2.1干热 210
10.2.2压力-蒸汽 210
10.2.3线 211
10.2.4化学 211
10.2.5无菌指示器 211
10.2.6过滤 212
10.3设备 214
10.3.1玻璃器皿 214
10.3.2玻璃移液管 217
10.3.3嫘盖 219
10.3.4清洁剂的选择 222
10.3.5种类繁杂的设备 222
10.3.6可重复使用的过滤器 224
10.4试剂与培养基 225
10.4.1水 226
10.4.2纯水器的维护 228
10.4.3衡盐溶液 228
10.4.4培养基的配制与 230
10.5培养基的 235
10.5.1可高压的培养基 235
10.5.2除菌过滤 235
10.5.3血清 244
10.5.4其他试剂的准备与 244
10.6培养基的质控、检测和储存 244
10.6.1质量控制 244
10.6.2无菌检测 245
10.6.3培养基和血清的培养检测 245
10.6.4储存 251
参文献 252
窘11章 原代培养 253
11.1原代培养入门 253
11.1.1用于解离组织的蛋白酶 253
11.1.2解离过程的共同特点 255
11.2组织分离 256
11.2.1小鼠 256
11.2.2鸡胚 260
11.2.3人体活检材料 261
11.3屎代培养的类型 263
11.3.1原代外植 263
11.3.2酶的解离作用 266
11.3.3温胰蛋白酶消化 267
11.3.4低温预处理的胰蛋白酶消化 270
11.3.5鸡胚器官原基 273
……