园艺分子生物学实验技术

图书标准信息

• 作者 王跃进、王西平 著
• 出版社 科学出版社
• 出版时间 2022-09
• 版次 1
• ISBN 9787030725714
• 定价 59.80元
• 装帧 平装
• 开本 16开
• 纸张 胶版纸
• 页数 190页
• 字数 290千字
• 正文语种 简体中文
• 丛书 科学出版社“十三五”普通高等教育研究生规划教材创新型现代农林院校研究生系列教材

【内容简介】

《园艺分子生物学实验技术》是在1995年为研究生开设的“现代生物技术”课程的基础上，吸收了生物技术发展的新技术与内容，*终编写而成的。《园艺分子生物学实验技术》共分12章，以园艺作物为研究对象，系统地介绍了核酸分离提取技术、基因克隆及表达分析技术、电泳及目的基因克隆测序、DNA分子标记技术、分子杂交技术、差异表达基因筛选技术、基因功能研究技术、基因调控研究技术、CRISPR/Cas9基因组编辑技术、细胞工程技术、转基因研究技术和植菌互作研究的可视化技术等的原理、方法与应用。

【目录】

目录 

第1章核酸分离提取技术1 

1.1脱氧核糖核酸（DNA）的分离提取1 

1.2核糖核酸（RNA）的分离提取4 

第2章基因克隆及表达分析技术8 

2.1聚合酶链式反应（PCR）技术8 

2.2cDNA末端快速扩增法（RACE）10 

2.3启动子染色体步移法13 

2.4实时荧光定量PCR技术17 

第3章电泳及目的基因克隆测序21 

3.1高等植物DNA琼脂糖凝胶电泳21 

3.2目的基因DNA片段回收与载体连接22 

3.3大肠杆菌感受态细胞制备24 

3.4DNA转化与重组克隆筛选鉴定25 

第4章DNA分子标记技术27 

4.1随机扩增多态性DNA（RAPD）分子标记27 

4.2限制性片段长度多态性（RFLP）分子标记29 

4.3扩增片段长度多态性（AFLP）分子标记32 

4.4相关序列扩增多态性（SRAP）分子标记36 

4.5简单序列重复（SSR）分子标记39 

4.6单核苷酸多态性（SNP）分子标记41 

4.7分子标记辅助选择技术44 

第5章分子杂交技术47 

5.1DNA印迹法47 

5.2RNA印迹法51 

5.3SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质54 

5.4蛋白质印迹法59 

5.5原位杂交64 

第6章差异表达基因筛选技术72 

6.1植物mRNA差异显示技术72 

6.2抑制消减杂交技术75 

6.3RNA-seq技术83 

6.4调控转录因子基因的microRNA预测87 

6.5microRNA定量分析90 

第7章基因功能研究技术95 

7.1超量表达技术95 

7.2RNAi技术98 

7.3亚细胞定位102 

第8章基因调控研究技术105 

8.1酵母双杂交技术105 

8.2双分子荧光互补技术107 

8.3免疫共沉淀技术111 

8.4蛋白质体外结合（pulldown）技术114 

8.5酵母单杂交技术119 

8.6双荧光素酶报告基因检测技术123 

8.7电泳迁移率变动分析（EMSA）技术126 

8.8染色质免疫沉淀（ChIP）技术130 

第9章CRISPR/Cas9基因组编辑技术134 

9.1靶点的选择与载体的构建134 

9.2靶点编辑效率的预评估139 

9.3遗传转化142 

9.4突变体的鉴定146 

第10章细胞工程技术149 

10.1离体快繁技术149 

10.2器官再生技术151 

10.3胚挽救育种技术155 

10.4多倍体检测技术158 

第11章转基因研究技术161 

11.1农杆菌介导的胚性愈伤组织的转基因技术161 

11.2农杆菌介导的不定芽培养技术164 

11.3农杆菌介导的体细胞胚瞬时转化技术――以葡萄体细胞胚为例166 

11.4基因枪法介导的洋葱表皮细胞瞬时转化技术169 

第12章植菌互作研究的可视化技术172 

12.1荧光蛋白标记172 

12.2碘化丙啶（PI）荧光染料染色174 

12.3台盼蓝染色176 

12.4苯胺蓝染色178 

12.5二氨基联苯胺（DAB）染色179 

主要参考文献182