• 分子微生物学实验指导
21年品牌 40万+商家 超1.5亿件商品

分子微生物学实验指导

正版新书 新华官方库房直发 可开电子发票

15.2 7.6折 20 全新

仅1件

江苏南京
认证卖家担保交易快速发货售后保障

作者柳志强 主编

出版社中国轻工业出版社

ISBN9787518414536

出版时间2017-07

版次1

装帧平装

开本16开

纸张胶版纸

页数102页

字数160千字

定价20元

货号SC:9787518414536

上书时间2024-12-24

文源文化

七年老店
已实名 已认证 进店 收藏店铺

   商品详情   

品相描述:全新
全新正版 提供发票
商品描述
作者简介:
柳志强,男。海南大学环境与植物保护学院副教授,研究方向为微生物天然产物分离与应用;植物病害生物防治;微生物功能基因。
内容简介:
本书共包括十四章,包括微生物核酸提取,聚合酶链反应,载体连接转化,大肠杆菌表达,分子杂交,DNA和蛋白质相互作用等目前分子微生物学领域常用的实验技术,章节顺序安排基本参照常规实验的流程。每个章节在概述部分对实验原理进行了详细阐述,便于读者对实验步骤的理解;在实验步骤中,结合前人经验总结了部分注意事项,可供广大读者进行参考;每章结尾均有思考题,可用于实验的复习和加深理解;书末还附录有本书所涉及的质粒图谱及微生物常用培养基配方,可供读者参考。
摘要:
    琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快速,可以分辨用其他方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙锭(Ethidium bromide, EB染色),在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外,还可以从电泳后的凝胶中回收特定的DNA条带,用于以后的隆操作。
    琼脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各种形状、大小和孔隙度。琼脂糖凝胶分离 DNA片度的范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至50kb的DNA 片段。琼脂糖通常用水平装置在强度和方向恒定的电场下电泳。聚丙烯酰胺分离小片段DNA(5-500bp)效果较好,其分辩力极高,甚至相差1bp的DNA片段就能分开。聚丙烯酰胺凝胶电泳很快,可容纳相对大量的DNA,但制备和操作比琼脂糖凝胶困难。聚丙烯酰胺凝胶采用垂直装置进行电泳。目前,一般实验室多用琼脂糖水平平板凝胶电泳装置进行DNA电泳。
    琼脂糖主要在DNA制备电泳中作为一种固体支持基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场中,在中性pH下带负电荷的DNA向阳极迁移,其迁移速率由下列多种因素决定:
    1. DNA的分子大小
    线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子质量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难于在凝胶孔隙中蠕行,因而迁移的越慢。
    2. 琼脂糖浓度
    一个特定的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小,分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%,DNA片段介于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%。
    3. DNA分子的构象
    DNA分子在电场中移动速度不仅和分子质量有关,还和它本身构象有关。相同分子质量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动很快,而开环DNA移动很慢。如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引起还是因为含有其他DNA引起时,可从琼脂糖凝胶上将DNA带逐个回收,用同一种性内切酶分别水解,然后电泳,如在凝胶上出现相同的DNA图谱,则为同一种DNA。
    
...
目录:
第一章琼脂糖凝胶电泳
一、实验材料
二、实验仪器
三、操作步骤
四、技术要点
第二章基因组DNA的提取
一、从植物组织提取基因组DNA
二、从动物组织提取基因组DNA
三、细菌基因组DNA的制备
四、丝状真菌基因组DNA的制备
五、酵母基因组DNA的制备
六、基因组DNA的检测
第三章RNA的提取和cDNA合成
一、动植物组织mRNA提取
二、植物病毒RNA提取
三、丝状真菌RNA提取
四、细菌RNA提取
五、酵母RNA提取
六、cDNA的合成
第四章聚合酶链反应(PCR)
一、常规PCR技术
二、降落PCR
三、RACE技术
四、实时荧光定量PCR
第五章DNA酶切
一、实验材料
二、实验仪器
三、操作步骤
四、技术要点
第六章重组质粒的连接
一、实验材料
二、实验仪器
三、操作步骤
四、技术要点
第七章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化
一、CaCl2法制备感受态细胞及转化
二、大肠杆菌超级感受态细胞的制备
三、电转化感受态细胞的制备及转化
第八章质粒DNA的提取
一、实验材料
二、操作步骤
三、技术要点
第九章聚丙烯酰胺凝胶电泳
一、实验材料
二、实验仪器
三、操作步骤
四、技术要点
第十章融合蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化
一、实验材料
二、实验仪器
三、操作步骤
四、技术要点
第十一章分子杂交技术
一、核酸探针标记的方法
二、Southern杂交
...

—  没有更多了  —

以下为对购买帮助不大的评价

全新正版 提供发票
此功能需要访问孔网APP才能使用
暂时不用
打开孔网APP