{正版现货新书} 孢壁蛋白在构成微孢子虫孢壁和侵染宿主中的作用研究 9787524003342 杨东林, 潘国庆, 著

第一章 概述 1

1.1 微孢子虫概述. 1

1.2 微孢子虫的生物学特征. 2

1.2.1 微孢子虫的形态与结构. 2

1.2.2不同发育时期微孢子虫的获得及其特征. 3

1.2.3 微孢子虫粘附侵染机制的研究. 7

1.3原生动物和微孢子虫孢壁蛋白及孢壁构成机制的研究进展. 10

1.3.1原生动物孢壁蛋白研究进展. 10

1.3.2微孢子虫孢壁蛋白研究进展. 15

1.3.3原生动物和微孢子虫孢壁构成机制的研究进展. 16

第二章 家蚕微孢子虫Nbhswp7和Nbhswp9基因序列的生物信息学及其转录活性分析. 27

2.1 材料与方法. 27

2.1.1 材料. 27

2.1.2 主要方法. 29

2.2结果与分析. 32

2.2.1 家蚕微孢子虫NbHSWP7和NbHSWP9的基本特征. 32

2.2.2 家蚕微孢子虫NbHSWP7和NbHSWP9二级结构分析. 35

2.2.3 家蚕微孢子虫NbHSWP7和NbHSWP9功能结构域分析. 36

2.2.4 家蚕微孢子虫NbHSWP7和NbHSWP9的亚细胞定位预测. 38

2.2.5 家蚕微孢子虫Nbhswp7和Nbhswp9共线性分析. 39

2.2.6 家蚕微孢子虫NbHSWP7和NbHSWP9保守性分析. 40

2.2.7 家蚕微孢子虫Nbhswp7和Nbhswp9转录活性分析. 40

2.3 结论与讨论. 41

第三章 家蚕微孢子虫NbHSWP7和NbHSWP9的定位分析. 43

3.1 材料与方法. 43

3.1.1 材料. 43

3.1.2 原核表达载体. 43

3.1.3 主要试剂与仪器. 43

3.1.4 主要方法. 50

3.2 结果与分析. 57

3.2.1 家蚕微孢子虫Nbhswp7和Nbhswp9的基因克隆. 57

3.2.2 家蚕微孢子虫Nbhswp7和Nbhswp9重组质粒原核表达及融合蛋白纯化. 60

3.2.3 家蚕微孢子虫NbHSWP7和NbHSWP9的免疫印迹分析. 62

3.2.4 家蚕微孢子虫NbHSWP7和NbHSWP9的定位研究. 65

3.3 结论与讨论. 73

第四章 家蚕微孢子虫NbSWP7与NbSWP9的互作关系分析. 77

4.1 材料与方法. 77

4.1.1 材料. 77

4.1.2 主要试剂与仪器. 77

4.1.3 主要方法. 78

4.2 结果与分析. 80

4.2.1 免疫共沉淀分析NbSWP7与NbSWP9之间的相互作用. 80

4.2.2 非还原处理样品分析NbSWP7与NbSWP9之间的相互作用. 82

4.2.3 Far-western blotting分析NbSWP7与NbSWP9之间的相互作用. 82

4.2.4 酵母双杂交分析NbSWP7和NbSWP9之间的相互作用. 83

4.3 结论与讨论. 86

第五章 孢壁蛋白在构成孢壁中的作用. 89

5.1 材料与方法. 89

5.1.1 材料. 89

5.1.2 主要试剂与仪器. 89

5.1.3 主要方法. 90

5.2 结果与分析. 93

5.2.1 家蚕微孢子虫脱蛋白几丁质壳的提取及鉴定. 93

5.2.2 孢壁蛋白与几丁质结合分析作用 105

5.2.3 孢壁蛋白与NbPTPs之间的互作及其在孢子发芽中的作用研究. 117

5.3 结论与讨论. 124

第六章 孢壁蛋白在介导微孢子虫侵染宿主中的作用研究. 89

6.1 材料与方法. 89

6.1.1 材料. 89

6.1.2 主要试剂与仪器. 89

6.1.3 主要方法. 90

6.2 结果与分析. 93

6.2.1 孢壁蛋白在家蚕微孢子虫发芽过程中的作用. 93

6.2.2 孢壁蛋白在家蚕微孢子虫侵染宿主中的作用研究. 117

6.3 结论与讨论. 124

参考文献. 135

附 录. 147

本书系统探讨了家蚕微孢子虫孢壁蛋白NbSWP7和NbSWP9在孢子形成、发芽及侵染宿主中的关键作用，并详细解析了其序列特征、亚细胞定位、蛋白互作及生物学功能。首先，本书通过生物信息学分析揭示了NbSWP7和NbSWP9的基因结构、保守性及进化关系，并预测其在孢子感染过程中的潜在功能。接着，基于原核表达系统成功制备了NbSWP7和NbSWP9的重组蛋白，并利用免疫荧光及免疫电镜技术明确了二者在孢子不同发育阶段的亚细胞定位，证实其在孢壁形成过程中的动态分布规律。进一步地，采用免疫共沉淀、far-western及酵母双杂交等技术解析了NbSWP7和NbSWP9之间的相互作用，阐明了它们在孢壁结构稳定性中的协同作用机制。此外，通过蛋白-几丁质结合实验及孢子发芽检测，揭示了NbSWP9在孢子极管锚定及发芽中的关键作用。最后，本书重点分析了NbSWP7和NbSWP9在宿主细胞粘附与侵染中的功能。