生物化学实验(第6版)
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作者李俊,张冬梅,陈钧辉 编
出版社科学出版社
ISBN9787030633521
出版时间2020-01
装帧平装
开本16开
定价59.8元
货号1203004231
上书时间2024-11-21
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目录
第六版前言
第五版前言
第一章糖类1
实验1糖的颜色反应1
实验1.1莫氏实验1
实验1.2塞氏实验2
实验1.3杜氏实验4
实验2糖的还原作用5
实验3糖的旋光性和变旋现象6
实验4血糖的定量测定（Folin-Wu法）9
实验5血糖的定量测定（葡萄糖氧化酶法）11
实验6血液中葡萄糖的测定（邻甲苯胺法）13
实验7植物组织中可溶性总糖的测定（蒽酮比色法）15
实验8总糖和还原糖的测定（3,5-二硝基水杨酸法）18
实验9淀粉的制备与水解20
实验10淀粉的分离纯化及其组分含量的测定22
实验11果胶的提取与果胶含量的测定25
第二章脂质29
实验12脂肪的组成29
实验13卵磷脂的提取和鉴定31
实验14粗脂肪含量的测定（Soxhlet抽提法）32
实验15碘价的测定（Hanus法）35
实验16皂化价的测定37
实验17脂肪酸价的测定39
实验18脂肪乙酰价的测定40
实验19血清胆固醇的定量测定（磷硫铁法）42
实验20血清总胆固醇的测定（邻苯二甲醛法）43
实验21血清胆固醇的定量测定（乙酸酐法）45
实验22血清甘油三酯简易测定法47
实验23血清甘油三酯的测定（GPO-PAP法）49
实验24丙二醛（MDA）的测定51
第三章蛋白质55
实验25蛋白质的颜色反应55
实验26蛋白质的沉淀反应58
实验27蛋白质浓度测定（微量凯氏定氮法）60
实验28蛋白质浓度测定（双缩脲法）63
实验29蛋白质浓度测定（Folin-酚试剂法）65
实验30蛋白质浓度测定（紫外光吸收法）66
实验31蛋白质浓度测定（考马斯亮蓝结合法）68
实验32非蛋白氮（NPN）的测定70
实验33甲醛滴定法72
实验34DNP-氨基酸的制备和鉴定73
实验35DNS-氨基酸的制备和鉴定76
实验36用DNS法鉴定蛋白质或多肽的N-端氨基酸79
实验37用DNS法测定多肽的氨基酸组成82
实验38肽的序列分析（PTH法）84
实验39尿素对蛋白质的变性作用86
实验40氨基酸纸层析法88
实验41氨基酸微晶纤维素薄板层析法91
实验42离子交换柱层析法分离氨基酸93
实验43血清白蛋白的分离与纯化95
实验44凝胶层析法分离纯化蛋白质97
实验45DEAE-SephadexA-25分离纯化多肽100
实验46亲和层析法分离纯化单克隆抗体102
实验47醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质103
实验48血清糖蛋白醋酸纤维薄膜电泳106
实验49牛乳中酪蛋白和乳糖的制备与鉴定109
实验50聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法分离血清蛋白质111
实验51聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法鉴定胰岛素114
实验52SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量117
实验53用等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点120
实验54对流免疫电泳法测定胎儿甲种蛋白质122
实验55火箭免疫电泳法124
实验56Western印迹126
实验57酶联免疫吸附测定（ELISA）128
第四章核酸131
实验58核酸的定量测定（定磷法）131
实验59酵母RNA的提取133
实验60RNA的定量测定（苔黑酚法）135
实验61动物肝脏中DNA的提取136
实验62DNA的定量测定（二苯胺法）138
实验635′-核苷酸的定量测定（过碘酸氧化法）139
实验64DEAE-纤维素薄板层析法测定核苷酸142
实验65核酸的酶法降解以及葡聚糖凝胶层析法制备5′-单核苷酸144
实验66质粒DNA的提取145
实验67DNA琼脂糖凝胶电泳147
第五章酶151
实验68影响酶促反应的因素——温度、pH、激活剂及抑制剂151
实验69胰蛋白酶米氏常数的测定154
实验70胆碱酯酶米氏常数的测定157
实验71过氧化氢酶米氏常数的测定159
实验72用正交法测定几种因素对酶活力的影响161
实验73胰蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氯对胰蛋白酶的抑制作用164
实验74溶菌酶的提纯结晶和活力测定166
实验75猪胰糜蛋白酶的制备和纯度鉴定168
实验76大肠杆菌碱性磷酸酶的制备170
实验77碱性磷酸酶的提取和分离及比活力测定173
实验78大蒜细胞SOD的提取和分离及活力测定177
实验79琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶180
实验80聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶182
实验81肝脏谷丙转氨酶活力测定184
实验82血清谷丙转氨酶活力测定187
第六章维生素190
实验83维生素A的定性测定190
实验84维生素B1的定性测定191
实验85维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）192
实验86维生素C的定量测定（磷钼酸法）195
实验87核黄素（维生素B2）荧光光度定量测定法197
实验88胡萝卜素的定量测定199
实验89荧光法测定核黄素结合蛋白-核黄素的解离常数201
第七章激素204
实验90甲状腺素的测定204
实验91雌二醇的测定206
第八章物质代谢与生物氧化208
实验92肌糖原的酵解作用208
实验93脂肪酸的β-氧化210
实验94发酵过程中无机磷的被利用和ATP的生成（ATP的生物合成）213
第九章综合实验215
实验95肝素钠的分离提纯及含量测定215
实验95.1肝素钠粗制品的制备之（Ⅰ）——盐解法215
实验95.2肝素钠粗制品的制备之（Ⅱ）——酶解法217
实验95.3肝素钠粗制品的纯化220
实验95.4肝素钠的生物测定法222
实验95.5肝素钠的定量测定225
实验96用高效液相层析（HPLC）定量测定胰岛素中的氨基酸227
实验96.1胰岛素的酸水解227
实验96.2用HPLC定量测定胰岛素水解产物中的氨基酸228
实验97维生素C对过氧化氢（H2O2）诱导的小鼠巨噬细胞氧化损伤的保护作用231
实验97.1小鼠腹腔巨噬细胞的收集与培养231
实验97.2MTT法测定巨噬细胞死亡率232
实验97.3活性氧检测试剂盒探测细胞内活性氧的水平234
实验97.4NO和NO合成酶活性的测定235
实验98酵母醇脱氢酶的提纯及其性质的研究237
实验98.1酵母醇脱氢酶的提纯237
实验98.2酵母醇脱氢酶的凝胶层析240
实验98.3酵母醇脱氢酶的专一性241
实验98.4酵母醇脱氢酶的动力学研究243
实验99α-淀粉酶的分离纯化、鉴定和Km、Vmax的测定249
实验99.1α-淀粉酶的活力测定249
实验99.2α-淀粉酶的疏水层析252
实验99.3α-淀粉酶的离子交换柱层析254
实验99.4聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法鉴定α-淀粉酶255
实验99.5米氏常数（Km）和最大反应速率（Vmax）的测定257
实验100螺旋藻藻蓝蛋白的分离、纯化与鉴定260
实验100.1螺旋藻粗藻蓝蛋白的制备260
实验100.2离子交换柱层析法分离藻蓝蛋白261
实验101原花色素的提取、纯化与测定262
实验101.1山楂原花色素的提取263
实验101.2原花色素的测定（Ⅰ）264
实验101.3原花色素的测定（Ⅱ）266
实验102熊果酸的制备和测定267
实验102.1山楂熊果酸的制备268
实验102.2熊果酸含量测定268
实验103镍化合物诱导人Jurkat细胞凋亡途径的研究270
实验103.1Jurkat细胞的培养270
实验103.2Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡272
实验103.3RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2的表达274
实验103.4酶联免疫吸附检测Bcl-2蛋白表达水平276
实验104cDNA的制备与鉴定278
实验104.1从HepG2细胞中提取总RNA278
实验104.2逆转录获得人HepG2细胞的cDNA280
实验104.3cDNA中肝癌相关基因AFP的鉴定282
第十章临床生化指标的自动测定286
附录287
一、生物化学实验须知287
二、玻璃仪器的洗涤及一些常用的洗涤剂288
三、移液器的使用289
四、吸管的使用290
五、过滤和离心291
六、930型荧光光度计的使用292
七、UV2600紫外可见分光光度计的使用293
八、Nano-200超微量核酸分析仪296
九、自动生化分析仪298
十、全自动免疫分析仪TOSOH AIA 2000标准化操作规程298
十一、血红蛋白检测仪Bio-Rad D-10标准化操作规程298
十二、实验室常用酸碱的相对密度和浓度298
十三、常用酸碱指示剂298
十四、缓冲液的配制299
十五、恒沸盐酸的制备305
十六、大肠杆菌丙酮粉的制备305
十七、生物化学中某些重要化合物的Mr及pK值305
十八、氨基酸的一些物理常数307
十九、某些蛋白质的物理性质308
二十、化学元素的相对原子质量表309
二十一、离心机转速（r/min）与相对离心力（RCF）的换算310
二十二、硫酸铵饱和度的常用表312
二十三、常用离子交换剂313
二十四、常用凝胶过滤层析介质315
主要参考文献317
内容摘要
本书是“十二五”普通高等教育本科国家级规划教材《普通生物化学》（陈钧辉教授等编著）的配套实验教材。本书在第五版使用的基础上进行了修订，全书共十章，100多个实验，内容设置与《普通生物化学》教材一致，包括糖类、脂质、蛋白质、核酸、酶、维生素、激素、物质代谢与生物氧化，涵盖了当今生物化学研究中常用的技术和方法，既保留了一些旨在加强学生基本实验方法和技能训练的传统实验，也引进了一些新近发展起来的生化实验技术。同时，还增加了为培养学生应用能力和创新能力的综合实验，每个实验后附有思考题，非常适合作为本科教学的同步教材。为进一步拓宽学生的知识面，另有一些生物化学仪器分析的内容及部分配套实验操作视频放在科学出版社教学服务网站上，供读者观看。
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