基因工程(普通高等教育十三五规划教材)/生物科学生物技术系列
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作者编者:金红星
出版社化学工业
ISBN9787122274427
出版时间2016-10
装帧其他
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定价39.8元
货号3634847
上书时间2024-10-16
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目录
第1章 绪论
1.1 基因工程的基本概念
1.2 基因工程的理论和技术
1.2.1 基因工程所依赖的核心理论
1.2.2 基因工程所依赖的核心技术
1.3 基因工程的建立与发展
1.3.1 基因工程的建立
1.3.2 基因工程的发展
1.4 基因工程的产业化及应用
1.4.1 产业化
1.4.2 基因工程的应用
1.5 转基因生物的安全性与伦理
1.5.1 转基因生物的安全性
1.5.2 转基因生物的伦理
1.6 应用事例
1.6.1 问题的提出
1.6.2 生化产品生产中存在的问题
1.6.3 基因工程的用途
1.6.4 实例
第2章 基因
2.1 “遗传因子”——生物性状遗传的符号
2.2 基因——位于染色体上的遗传功能单位
2.2.1 等位基因
2.2.2 复等位基因
2.3 顺反子——一个基因一条多肽
2.4 操纵子——遗传信息传递和表达的统一体
2.5 超基因
2.6 假基因
2.7 断裂基因
2.7.1 RNA剪接
2.7.2 内含子的类型
2.8 重叠基因
2.9 可动基因
2.9.1 Ac-Ds系统
2.9.2 插入序列
2.9.3 转座子
2.9.4 P因子
2.9.5 反转录转座子
2.10 癌基因和抑癌基因
2.11染色体外基因
2.11.1 质粒
2.11.2 线粒体基因
2.11.3 叶绿体基因
2.11.4 非孟德尔遗传
第3章 工具酶
3.1 限制性核酸内切酶
3.1.1 宿主的限制和修饰现象
3.1.2 限制性核酸内切酶的类型
3.1.3 限制性核酸内切酶的命名
3.1.4 影响限制性核酸内切酶活性的因素
3.1.5 限制性核酸内切酶对DNA的消化作用
3.1.6 限制性核酸内切酶反应的终止
3.1.7 限制性核酸内切酶酶切反应的操作步骤和注意事项
3.2 DNA聚合酶
3.2.1 DNA聚合酶Ⅰ（E.coli）
3.2.2 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段
3.2.3 T4DNA聚合酶
3.2.4 依赖于RNA的DNA聚合酶
3.2.5 T7DNA聚合酶
3.2.6 修饰的T7DNA聚合酶
3.3 DNA连接酶
3.3.1 大肠杆菌和T4噬菌体的DNA连接酶
3.3.2 影响连接反应的因素
3.3.3 DNA片段在体内和体外的连接——黏性末端的连接
3.3.4 平齐末端的连接
3.3.5 连接反应的注意事项
3.4 DNA及RNA的修饰酶
3.4.1 末端脱氧核苷酸转移酶
3.4.2 T4多核苷酸激酶
3.4.3 碱性磷酸酶
3.5 核酸外切酶
3.5.1 核酸外切酶Ⅶ
3.5.2 核酸外切酶Ⅲ
3.5.3 λ核酸外切酶和T7基因6核酸外切酶
3.6 单链核酸内切酶
3.6.1 S1核酸酶
3.6.2 Bal31核酸酶
3.7 细胞裂解酶
3.7.1 溶菌酶
3.7.2 蛋白酶K
3.7.3 纤维素酶
3.7.4 其他裂解酶
3.8 其他
3.8.1 琼脂糖酶
3.8.2 核酸酶抑制剂
第4章 载体
4.1 质粒载体
4.1.1 质粒的一般生物学特性
4.1.2 质粒载体的选择
4.1.3 常用的大肠杆菌质粒载体
4.2 噬菌体载体
4.2.1 单链噬菌体载体
4.2.2 双链噬菌体载体
4.3 柯斯质粒载体
4.3.1 柯斯质粒载体的组成
4.3.2 柯斯质粒载体的特点
4.3.3 柯斯质粒载体的应用
4.4 噬菌粒载体
4.4.1 噬菌粒载体的概念
4.4.2 pUC118和pUC119噬菌粒载体
4.4.3 pBluescript噬菌粒载体
4.5 人工染色体载体
4.5.1 酵母人工染色体载体
4.5.2 细菌人工染色体载体
4.5.3 P1人工染色体载体
第5章 重组DNA分子的转化与重组子筛选
5.1 DNA分子的转化与扩增
5.1.1 DNA重组转化的基本概念
5.1.2 受体细胞的选择
5.1.3 转化方法
5.1.4 转化率及其影响因素
5.1.5 转化细胞的扩增
5.1.6 进行转化时的注意事项
5.2 重组体克隆的筛选与鉴定
5.2.1 遗传检测法
5.2.2 物理检测法
5.2.3 核酸杂交法
5.2.4 PCR检测法
5.2.5 克隆基因定位法
5.2.6 测序检测法
5.2.7 外源基因表达产物检测法
第6章 大肠杆菌基因工程
6.1 外源基因在大肠杆菌高效表达的原理
6.1.1 启动子
6.1.2 终止子
6.1.3 核糖体结合位点
6.1.4 密码子
6.1.5 质粒拷贝数
6.2 大肠杆菌工程菌的构建策略
6.2.1 包涵体型异源蛋白的表达
6.2.2 分泌型异源蛋白的表达
6.2.3 融合型异源蛋白的表达
6.2.4 寡聚型异源蛋白的表达
6.2.5 整合型异源蛋白的表达
6.2.6 蛋白酶抗性或缺陷型表达系统的构建
6.3 重组异源蛋白的体外复性活化
6.3.1 蛋白质变性的动力学原理
6.3.2 折叠中间状态分子的集聚作用
6.3.3 包涵体的溶解与变性
6.3.4 异源蛋白的复性与重折叠
6.4 基因工程菌的遗传不稳定性及其对策
6.4.1 基因工程菌遗传不稳定性的表现与机制
6.4.2 改善基因工程菌不稳定性的策略
6.5 大肠杆菌基因工程的案例
第7章 酵母菌基因工程
7.1 酵母菌的宿主系统
7.1.1 提高重组蛋白表达产率的突变宿主菌
7.1.2 抑制超糖基化作用的突变宿主菌
7.1.3 减少泛素依赖型蛋白降解作用的突变宿主菌
7.1.4 内源性蛋白酶缺陷型的突变宿主菌
7.2 酵母菌的载体系统
7.2.1 酿酒酵母的2μ环状质粒
7.2.2 乳酸克鲁维酵母的线型质粒
7.2.3 果蝇克鲁维酵母的环状质粒
7.2.4 含ARS的YRp和YEp
7.2.5 含CEN的YCp
7.2.6 穿梭载体
7.3 酵母菌的转化系统
7.3.1 酵母菌的转化程序
7.3.2 转化质粒在酵母细胞中的命运
7.3.3 用于转化子筛选的标记基因
7.4 酵母菌的表达系统
7.4.1 酵母菌启动子的基本特征与选择
7.4.2 酵母菌启动子的可调控表达系统
7.4.3 外源基因在酵母菌中表达的限制因素
7.4.4 酵母菌表达系统的选择
7.5 酵母菌基因工程的案例
第8章 核酸的分离纯化与目的基因的克隆
8.1 核酸的分离纯化
8.1.1 核酸分离提取的原则
8.1.2 核酸的分离提取
8.1.3 质粒DNA的提取
8.1.4 RNA的提取
8.1.5 核酸的检测
8.2 目的基因的克隆
8.2.1 鸟枪法
8.2.2 cDNA法
8.2.3 PCR扩增法
8.2.4 化学合成法
8.2.5 基因文库的构建
第9章 基因组
9.1 基因组剖析
9.1.1 基因组序列复杂性
9.1.2 原核生物基因组
9.1.3 真核生物基因组
9.2 基因组测序
9.2.1 DNA测序方法
9.2.2 基因组测序
9.2.3 序列组装
9.3 基因组序列注释
9.3.1 搜寻基因
9.3.2 基因注释
9.3.3 基因功能检测
9.3.4 高通量基因功能研究方法
9.4 功能基因组学
9.4.1 组学简介
9.4.2 转录物组
9.4.3 蛋白质组
9.4.4 基因本体
9.5 基因组表观遗传
9.5.1 什么是表观遗传
9.5.2 位置效应
9.5.3 DNA甲基化
9.5.4 染色体重建
9.6 基因组编辑
9.6.1 遗传重组
9.6.2 基因敲除
9.6.3 新一代的基因组定点编辑技术
第10章 蛋白质工程
10.1 蛋白质工程的基本概念
10.1.1 蛋白质工程的基本特征
10.1.2 蛋白质工程的研究内容和应用
10.1.3 蛋白质工程实施的必要条件
10.2 基因的体外定向突变
10.2.1 局部随机掺入法
10.2.2 碱基定点转换法
10.2.3 部分片段合成法
10.2.4 引物定点引入法
10.2.5 PCR扩增突变法
10.3 基因的体外定向进化
10.3.1 易错PCR
10.3.2 DNA改组
10.3.3 体外随机引发重组
10.3.4 交错延伸
10.3.5 过渡模板随机嵌合生长
10.3.6 渐增切割杂合酶生成
10.3.7 同源序列非依赖性蛋白质重组
10.3.8 突变文库的筛选模型
10.4 蛋白质工程的设计思想与应用
10.4.1 提高蛋白质或酶的稳定性
10.4.2 减少重组多肽链的错误折叠
10.4.3 改善酶的催化活性
10.4.4 消除酶的被抑制特性
10.4.5 修饰酶的催化特异性
10.4.6 强化配体与其受体的亲和性
第11章 途径工程
11.1 途径工程的基本概念
11.1.1 途径工程的基本定义
11.1.2 途径工程的基本过程
11.1.3 途径工程的基本原理
11.2 途径工程的研究战略
11.2.1 在现存途径中提高目标产物的代谢流
11.2.2 在现存途径中改变物质流的性质
11.2.3 利用已有途径构建新的代谢旁路
11.3 初级代谢的途径工程
11.3.1 发酵生产乙醇的基本战略
11.3.2 酵母菌属乙醇发酵途径的改良
11.3.3 高产乙醇的重组大肠杆菌的构建
11.3.4 直接利用太阳能合成乙醇的光合细菌途径设计
11.4 次级代谢的途径工程
11.4.1 提高次级代谢产物的手段
11.4.2 红霉素（聚酮类抗生素）的生物合成
11.4.3 提高红霉素A产量的策略
附录
参考文献
内容摘要
金红星编著的《基因工程》主要阐述了基因、工具酶、载体、重组DNA分子的转化与重组子筛选、大肠杆菌基因工程、酵母菌基因工程、核酸的分离纯化与目的基因的克隆、基因组、蛋白质工程和途径工程等内容。
本书的特色：①讲解了基因和基因组；②重点讲述了原核微生物的代表——大肠杆菌和真核微生物的代表——酵母菌的基因工程；③简要介绍了第二代基因工程——蛋白质工程和第三代基因工程——途径工程；④介绍了实验过程中的注意事项和实例，在附录中罗列了一些补充内容；⑤详细讲述了三代DNA测序和多种基因组定点编辑（同源重组、RecET／Red重组系统、ZFN、TALEN和CRISPR—Cas系统）的原理；⑥详细讲述了分离纯化核酸与克隆基因的基本原理。
本书是针对生物工程专业的本科生编写的教材，可供生物技术和生物科学专业的本科生使用，也可供研究生和有关科研人员参考。
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