病毒性腹泻防治手册

    
《病毒性腹泻防治手册》较全面地介绍了病毒性腹泻的病原体、临床表现、实验室检测、预防控制措施等知识，指导性强，适于广大医务人员用作防治病毒性腹泻的专业参考用书、培训教材。本书通俗易懂，还可为编写科普宣传读物提供素材和依据。

    第二章　病原学
    节　轮状病毒
   轮状病毒是各种幼龄动物非菌性腹泻的主要病原之一，其中人轮状病毒是引起婴幼儿腹泻的重要病原，也可在成人中引起局部暴发。轮状病毒属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)。1973年，澳大利亚学者R．F．Bishop等人首次用电镜在腹泻患者的十二指肠黏膜超薄切片中发现了轮状病毒，因为该病毒负染后在电镜下观察呈车轮状，所以命名为轮状病毒。
　  一、基本特征
 　轮状病毒颗粒呈圆球形，无包膜，表面光滑。成熟的病毒颗粒直径约为100nm，具有独特的3层衣壳蛋白结构。外层衣壳由VP4蛋白和VP7蛋白构成，其中VP4蛋白构成的刺突分布于病毒体表面，VP7蛋白则包裹病毒形成直径约75nm的二十面体。中层衣壳由VP6蛋白组成，而核心内层衣壳则由VP1、VP2和VP3组成。
   轮状病毒的基因组由11个双链RNA节段组成，约18550bp。每个节段含一个开放读码框，分别编码6个结构蛋白(VP1、VP2、VP3、VP4、VP6和VP7)和5个非结构蛋白(NSP1～NSP5)。根据NSP4基因序列的特点，可将轮状病毒分为A、B、C、D、E至少5个基因型。轮状病毒的结构蛋白和非结构蛋白决定了病毒的感染性、免疫原性，并在影响病毒结构与功能方面起重要作用。
  　二、病毒培养
 　若干轮状病毒株，如猴的SAll株、牛的Nebraska株和O株都较容易进行细胞培养，但轮状病毒的许多毒株迄今都未能适应细胞培养，分离的成功率在40％～70％。人和猪的轮状病毒只能在特殊的细胞株如恒河猴胚肾细胞MA104株和非洲绿猴肾传代细胞CV-1株中增殖。胰蛋白酶预处理是轮状病毒培养分离的重要条件，对已适应细胞培养的毒株维持较高的滴度也非常重要。因为不同保存时间、不同的生产批号等因素会影响胰蛋白酶的活性，所以在接种病毒前，应先测定胰蛋白酶的需要量。因为牛血清对胰蛋白酶有抑制作用，所以分离过程中使用的都是无牛血清维持液。但有报道称在维持液中加入2％～4％的鸡血清有利于轮状病毒在细胞中的培养。
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