[文轩] 工业微生物学实验技术(梁姗) 梁姗，陈今朝 主编 化学工业出版社

工业微生物学是从工业生产需要出发，研究微生物的生命及代谢途径，以及人为控制微生物代谢的规律，是一门实践性很强的应用学科。只有掌握扎实而广泛的基础知识和熟练的操作技能，才能真正掌握好这门应用学科，更好地服务于科研和生产。工业微生物学实验作为工科专业基础技术课程，是微生物学教学实践重要环节，是微生物学的理论基础和企业工厂生产实践的结合，能加深学生对工业微生物学基本理论的理解，加强对工业微生物的感性认识，为更好地从事生产服务和科学研究提供保障。

笔者教研组从工业微生物教学实际出发，根据多年的教学经验及学科发展的趋势与特点编写了本书。本实验教材共设置了48个实验，分为工业微生物学基础实验技术、工业微生物分离与鉴定技术、工业微生物育种技术三部分。部分包括培养基的配制和灭菌、菌种纯化培养、细菌的生理生化实验、基础发酵实验等，主要为基础验证性实验，加强学生对微生物学基本实验技能的学习。第二部分包括16S rRNA基因序列分析鉴定方法、各种生境中微生物的分离与鉴定实验，主要为综合性实验，促进学生综合素质的培养。第三部分主要包括各类诱变、原生质体融合、基因组改组等实验方法，主要为设计性实验，促进学生创新能力的培养。

本实验教材适合高等院校生物工程、生物技术、生物科学、食品科学与工程、食品质量与安全、环境科学与工程等理工专业的本科生教学使用，也适合于高等职业技术学院相关专业的学生教学使用。

由于编者的水平和能力有限，难免有不足、疏漏和不妥之处，敬请同行专家和广大读者批评指正，以便使本书在使用中不断完善和提高。

编者

2021年3月

《工业微生物学实验技术》分为工业微生物学基础实验技术、工业微生物分离与鉴定技术、工业微生物育种技术三大部分。本书共设置了48个实验，包括培养基的配制和灭菌、菌种纯化培养、发酵过程分析、微生物分离鉴定和微生物育种实验等，适合于微生物实验和微生物遗传育种实验教学。

本书适合高等院校生物工程、生物技术、生物科学、食品科学与工程、食品质量与安全、环境科学与工程等理工专业的本科生教学使用，也适合于高等职业技术学院相关专业的专科生教学使用。

梁姗，长江师范学院副教授，毕业于四川大学生物化学与分子生物学专业，主要承担生物化学与分子生物学、微生物学教学，主要研究天然产物活性、工业微生物的筛选与应用，建有微生物学精品在线课程，开设了微生物学与人类健康公选课程，主持重庆市自然科学基金面上项目1项，重庆市*项目2项。

工业微生物学实验规则与安全 1

部分　工业微生物学基础实验技术 3

实验1 普通光学显微镜的构造及使用 4

实验2 培养基的配制与灭菌 8

实验3 细菌的染色及特殊结构观察 13

实验4 放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察 19

实验5 微生物的接种 24

实验6 微生物的分离、纯化和接种 28

实验7 微生物大小及数量的测定 31

实验8 微生物平板菌落计数 38

实验9 细菌生长曲线的测定 41

实验10 菌种的保藏 43

实验11 厌氧菌的分离与培养 48

实验12 细菌的生理生化实验 54

实验13 环境因素对微生物生长的影响 62

实验14 噬菌体的分离、纯化及其效价的测定 66

实验15 细菌感受态的制备和质粒的转化 70

实验16 凝集反应 73

实验17 酒精发酵 77

实验18 谷氨酸发酵 81

实验19 食用真菌的培养 86

第二部分　工业微生物分离与鉴定技术 91

实验20 利用16S rRNA基因序列分析进行微生物分类鉴定 92

实验21 活性污泥中菌胶团及生物相的观察 96

实验22 土壤中四大类微生物的分离与鉴别 99

实验23 水中细菌总数和大肠菌群数的检测 104

实验24 固氮菌的分离纯化 111

实验25 酒曲中根霉菌的分离纯化 113

实验26 土壤中纤维素分解菌的分离 116

实验27 表面活性剂降解菌的分离及活性测定 119

实验28 苯酚降解菌的分离及活性测定 123

实验29 产淀粉酶芽孢杆菌的分离及活性测定 126

实验30 蛋白酶产生菌的筛选及活力的测定 130

实验31 脂肪酶产生菌的筛选 134

实验32 抗生素产生菌的分离与筛选 137

实验33 食品中菌落总数的测定 141

实验34 抗生素效价的生物测定 144

实验35 食品中大肠菌群的测定 147

实验36 食品中金黄色葡萄球菌的检验 151

实验37 食品中沙门菌检验 153

实验38 食品中双歧杆菌检验 160

实验39 酸乳中乳酸菌的测定 165

第三部分　工业微生物育种技术 169

实验40 细菌的紫外诱变 170

实验41 耐高温酵母菌株的诱变选育 173

实验42 淀粉酶高产菌株的诱变选育 175

实验43 营养缺陷型突变株的筛选和鉴定 180

实验44 谷氨酸棒杆菌的原生质体融合 185

实验45 酵母的原生质体融合 188

实验46 基因组改组选育谷氨酸高产菌 191

实验47 PCR定点突变改造微生物菌种 195

实验48 基于易错PCR的分子定向进化 199

附录 203

参考文献 208